急性肺血栓栓塞動物模型的建立與IL-13、TGF-β在肺栓塞中的作用初步探討.pdf

1、目的：肺血栓栓塞癥(Pulmonary thromboembolism，PTE)為來自靜脈系統(tǒng)或右心的血栓阻塞肺動脈或其分支所致的疾病，以肺循環(huán)和呼吸功能障礙為主要臨床和病理生理特征。目前對于PTE在分子及細胞水平的病理生理了解尚少，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為肺栓塞的病理進程與炎癥反應(yīng)有關(guān)。最近有文獻報道了肺動脈重建中的免疫學(xué)發(fā)病機理。本文提出假設(shè)認(rèn)為PTE后肺動脈重建與炎癥反應(yīng)及免疫反應(yīng)相關(guān)，并進行論證。
　　 IL-13是由不同T細胞亞群

2、和樹突狀細胞產(chǎn)生的多效能細胞因子，主要由Th2細胞分泌。有文獻報道IL-13系統(tǒng)是肺動脈平滑肌細胞生長的新型調(diào)節(jié)系統(tǒng)。
　　 此外，IL-13可以誘導(dǎo)潛在TGF-β的產(chǎn)生，間接激活TGF-β。同時，低氧也可促進TGF-β表達增高。而TGF-β是調(diào)控細胞增殖、分化的重要因子，能促進血管平滑肌細胞增殖、表型轉(zhuǎn)化及血管重構(gòu)，與多種心血管疾病發(fā)生密切相關(guān)。
　　 本課題詣在建立急性肺血栓栓塞模型，觀察肺栓塞的病理改變，并探討IL

3、-13、TGF-β在PTE肺動脈重建中的作用。
　　 方法：本課題分三部分進行：
　　 第一部分：日本大耳白36只，隨機分為急性肺血栓栓塞模型組18只、對照組18只。模型組采用自體血栓回輸法建立PTE模型，對照組給予等量0.9％氯化鈉溶液，經(jīng)數(shù)字減影血管造影及病理學(xué)檢查確定模型建造成功與否。
　　 第二部分：分別于48h、4d、14d采集模型組和對照組肺動脈及周圍肺組織，行HE染色及Masson染色進行病理學(xué)分析

4、。
　　 第三部分：分別于48h、4d、14d采集模型組及對照組血清，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗方法(ELISA)檢測IL-13、TGF-β含量。
　　 實驗數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組內(nèi)不同時間點比較采用方差分析(One-Way ANOVA)，各組間均數(shù)比較采用t檢驗(t-test analysis)，數(shù)據(jù)相關(guān)性分析采用Pearson檢驗，均以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

5、r>　　 結(jié)果：第一部分：對22只實驗兔進行造模，成功制作18只PTE模型。未成功的4只動物中，1只死于麻醉意外，3只死于大面積栓塞，成功率為81.8％。栓塞水平多位于段肺動脈，以雙肺栓塞為主，下肺為著。RR、HR、AaDO2升高均發(fā)生于肺栓塞早期。
　　 第二部分：受累肺動脈壁及遠端肺動脈分別于第4天和第2天可見以中性粒細胞為主的炎癥細胞數(shù)量增加(P<0.05)；于栓塞后第14天可見肺動脈內(nèi)膜明顯增厚(P<0.05)。

6、>　　 第三部分：肺栓塞后血清中IL-13、TGF-β水平分別于第4天和第14天升高，為36.86±3.06pg/mg、1591.67±55.01pg/mg，顯著高于對照組(P<0.05)。
　　 結(jié)論：1.自體血栓回輸法制備急性肺動脈血栓栓塞動物模型成功率為81.8％，具有可重復(fù)性。栓子分布與臨床上栓子分布相似。AaDO2可作為肺栓塞的早期診斷指標(biāo)。RR及HR變化于肺栓塞后即刻出現(xiàn)，但HR的恢復(fù)早于RR。
　　 2.