大黃素對(duì)實(shí)驗(yàn)性牙周炎大鼠牙齦組織及外周血中NO和IL-6的影響.pdf

1、目的：牙周鋼絲結(jié)扎建立牙周炎動(dòng)物模型，采用組織學(xué)、計(jì)量組織學(xué)觀(guān)察及酶聯(lián)免疫和硝酸還原酶檢測(cè)法，探討大黃素對(duì)牙周炎的治療作用。 方法：選用純種5月齡雌性SD大鼠96只，隨機(jī)分為4組：正常組、牙周炎組、大黃素低濃度治療組(低藥組)和大黃素高濃度治療組(高藥組)各24只。牙周炎組、低藥組和高藥組用直徑0.2mm的正畸鋼絲結(jié)扎大鼠雙側(cè)上頜第一磨牙頸部，結(jié)扎4周后隨機(jī)抽取動(dòng)物，制作上頜第一磨牙牙體牙周聯(lián)合切片，光鏡觀(guān)察確定牙周炎形成。自建

2、立牙周炎模型第1天起，低藥組用大黃素灌胃(80mg/kg·d)；高藥組用大黃素灌胃(160mg/kg·d)。正常組和牙周炎組灌服等量蒸餾水。于給藥后4周、6周、8周時(shí)，隨即抽取每組動(dòng)物8只，采用股動(dòng)脈放血法處死大鼠，留取血清，檢測(cè)血清中IL-6和一氧化氮(NO)水平，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。同時(shí)所有大鼠迅速分離上頜骨，一側(cè)立即放入10％甲醛溶液固定、經(jīng)過(guò)8％甲酸溶液脫鈣、梯度酒精脫水后，制作HE染色組織學(xué)切片，做光鏡及組織學(xué)計(jì)量觀(guān)察。另一側(cè)取

3、結(jié)扎牙周?chē)难例l組織測(cè)量IL-6和NO含量，并作統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果： 1牙周炎動(dòng)物模型鑒定：(結(jié)扎術(shù)后四周)結(jié)扎術(shù)后第四周光鏡觀(guān)察：結(jié)合上皮向根方增殖，形成淺牙周袋，牙齦上皮和固有層內(nèi)可見(jiàn)炎細(xì)胞輕度浸潤(rùn)；牙周纖維排列紊亂；牙槽嵴頂可見(jiàn)破骨細(xì)胞。 2光鏡組織學(xué)觀(guān)察 正常組(N)；建模后4周、6周、8周結(jié)合上皮位于釉牙骨質(zhì)界處，牙齦牙周膜纖維排列整齊，無(wú)炎癥反應(yīng)；牙槽嵴頂無(wú)吸收。 牙周炎組(P)：建模

4、后4、6、8周光鏡組織學(xué)觀(guān)察，4周時(shí)結(jié)合上皮向根方增殖，形成淺牙周袋，溝內(nèi)上皮和固有層內(nèi)可見(jiàn)炎細(xì)胞輕度浸潤(rùn)；牙周纖維排列紊亂；牙槽嵴頂可見(jiàn)破骨細(xì)胞。6周時(shí)結(jié)合上皮與牙體分離加深牙周袋，上皮內(nèi)和固有層可見(jiàn)炎細(xì)胞中度浸潤(rùn)，上皮釘突延伸，上皮增厚呈網(wǎng)狀；牙周膜纖維排列紊亂，毛細(xì)血管數(shù)目增多，擴(kuò)張充血；牙槽嵴高度降低。8周時(shí)固有層炎細(xì)胞中度浸潤(rùn)，較深牙周袋形成；牙周膜纖維稀疏、排列紊亂；牙槽嵴頂可見(jiàn)活躍的破骨細(xì)胞，牙槽嵴高度降低。 低藥

5、組(PL)和高藥組(PH)：建模后服藥4、6、8周同時(shí)光鏡組織學(xué)觀(guān)察，此兩組在組織學(xué)的表現(xiàn)無(wú)明顯差異。4周時(shí)牙齦上皮和固有層內(nèi)可見(jiàn)炎細(xì)胞輕度浸潤(rùn)；可見(jiàn)牙周膜成纖維細(xì)胞向成骨細(xì)胞轉(zhuǎn)變；牙槽嵴頂少量成骨細(xì)胞活動(dòng)。6周時(shí)牙齦上皮無(wú)糜爛，固有層內(nèi)可見(jiàn)炎細(xì)胞輕度浸潤(rùn)；大量牙周膜成纖維細(xì)胞向成骨細(xì)胞轉(zhuǎn)變；牙槽嵴頂多見(jiàn)成骨細(xì)胞排列。8周時(shí)牙齦上皮未見(jiàn)明顯炎癥改變，上皮下炎細(xì)胞輕度浸潤(rùn)；牙周膜纖維增生、排列較整齊；牙槽嵴頂表面成骨細(xì)胞密集；有新生骨基質(zhì)

6、形成。 3組織計(jì)量學(xué)觀(guān)察： 結(jié)締組織附著喪失：4周、6周、8周時(shí)，牙周炎組、低藥組、高藥組結(jié)締組織附著喪失明顯高于正常組(P＜0.05)；牙周炎組明顯高于低藥組、高藥組(P＜0.05)；低藥組、高藥組之間無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。 牙槽骨嵴高度喪失：4周、6周、8周時(shí)，牙周炎組、低藥組、高藥組牙槽骨嵴高度喪失明顯高于正常組(P＜0.05)；牙周炎組明顯高于低藥組、高藥組(P＜0.05)；低藥組、高藥組之間無(wú)顯

7、著性差異(P＞0.05)。 4牙齦組織中IL-6含量： 4周、6周、8周時(shí)，牙周炎組、低藥組、高藥組牙齦組織中IL-6含量明顯高于正常組(P＜0.05)；牙周炎組明顯高于低藥組、高藥組(P＜0.05)；低藥組、高藥組之間無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。 5牙齦組織中NO含量： 4周、6周、8周時(shí)，牙周炎組、低藥組、高藥組牙齦組織中NO含量明顯高于正常組(P＜0.05)；牙周炎組明顯高于低藥組、高藥組(P＜0

8、.05)；低藥組、高藥組之間無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。 6外周血中IL-6含量： 4周、6周時(shí)，牙周炎組、低藥組、高藥組外周血中IL-6含量與正常組之間無(wú)明顯差異(P＞0.05)；8周時(shí)，牙周炎組明顯高于低藥組、高藥組(P＜0.05)；低藥組、高藥組之間無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。 7外周血中NO含量： 4周、6周、8周時(shí)，牙周炎組、低藥組、高藥組外周血中NO含量明顯高于正常組(P＜0.05)，6周

9、、8周牙周炎組明顯高于低藥組、高藥組(P＜0.05)；低藥組、高藥組無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。 結(jié)論： 1.單純正畸鋼絲局部結(jié)扎建立了大鼠牙周炎模型。 2.正常的牙齦組織和血清中含有少量的NO和IL-6。 3.牙齦組織和血清中NO和IL-6的升高變化可反映牙周炎的病變程度。NO和IL-6的含量升高越明顯，牙周組織破壞越嚴(yán)重。 4.大黃素對(duì)牙周炎有一定的治療作用。 5.應(yīng)用大黃素治療可抑