血管緊張素Ⅱ1型受體拮抗劑對尿毒癥心肌血小板源性生長因子及其受體的影響.pdf

1、尿毒癥心肌病是尿毒癥患者的常見并發(fā)癥。除非進行腎臟移植，否則，無論采用血液透析還是腹膜透析，都無法得到徹底的改善，威脅患者的生存質(zhì)量。尿毒癥心肌病的發(fā)病機制十分復(fù)雜，多種神經(jīng)-體液因素參與其中。其主要分子生物學(xué)機制包括腎素-血管緊張素系統(tǒng)(RAS)，內(nèi)皮素系統(tǒng)、血栓素-前列腺素系統(tǒng)等等的過度興奮，其中RAS的作用十分確切。而尿毒癥心肌病涉及到的炎癥介質(zhì)更是種類繁多，其中就包括血小板源性生長因子(platelet—derived grow

2、th factor，PDGF)。RAS是介導(dǎo)尿毒癥心肌病的重要通路，多項研究表明，腎素-血管緊張素抑制劑(RASI)具有延緩心肌纖維化的作用，可以有效減少包括MHD患者在內(nèi)的死亡率。下調(diào)PDGF的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)可以減輕心肌纖維化。近期的研究表明，AT1R激活后可以直接上調(diào)PDGF的信號轉(zhuǎn)錄水平，發(fā)揮轉(zhuǎn)化生長因子β之外的致纖維化作用，由于PDGF的分布及其廣泛，血管緊張素Ⅱ的這一作用會涉及更多的臟器和組織，并且作用將被進一步放大。
　　因

3、此，本研究首先建立尿毒癥心肌病大鼠動物模型，檢測心肌組織PDGF受體的表達水平，同時觀察應(yīng)用血管緊張素Ⅱ1型受體拮抗劑(ARB)治療能否降低尿毒癥心肌病大鼠PDGF受體的表達水平，減輕模型大鼠的心肌損害程度。其次，選取規(guī)律血液透析患者，給予血管緊張素Ⅱ1型受體拮抗劑(ARB)治療，在血壓沒有較大波動的情況下，觀察患者的心臟功能以及血清PDGF水平的變化，判斷較大劑量的ARB是否能改善這部分血液透析患者的心臟功能;血清PDGF水平是否也隨

4、之波動。
　　本文主要從以下幾方面進行論述：
　　第一部分 血管緊張素Ⅱ1型受體拮抗劑對尿毒癥心肌病大鼠血小板源性生長因子的影響
　　目的:本研究通過建立尿毒癥心肌病大鼠動物模型，檢測心肌組織PDGF的表達水平，同時觀察應(yīng)用血管緊張素Ⅱ1型受體拮抗劑（ARB）治療能否降低尿毒癥心肌病大鼠PDGFα受體(PDGFRα)的表達水平，減輕模型大鼠的心肌損害程度。
　　方法:首先采用腎動脈分支結(jié)扎法建立5/6腎大部切除大

5、鼠模型，然后給予異丙腎上腺素連續(xù)腹腔注射，以完成尿毒癥大鼠心衰模型。大鼠分為三組:纈沙坦組（ARB組）:纈沙坦灌胃n=32;單純腎大切非干預(yù)組(NX組):等體積注射用水灌胃，n=32;假手術(shù)組（sham）:等體積注射用水灌胃，n=20。所有大鼠定期檢測尾動脈血壓、尿白蛋白/尿肌酐比值。5/6腎大部切除的大鼠于二期手術(shù)后7天開始進入正式試驗。在0周和開始后滿6周、滿10周和滿11周各時間點，每組處死分別8只大鼠。分別留取血液和心肌、腎臟組

6、織，進行生化檢測和組織病理檢測。光學(xué)顯微鏡下，觀察心肌纖維化程度，進行Rona標準評分，同時應(yīng)用ImagePro Plus software6.0圖像分析系統(tǒng)，計算心肌組織中膠原容積分數(shù)(CVF);免疫組化觀察心肌組織PDGF受體(PDGFR)的表達水平;蛋白免疫印記(Western Blot)法檢測心肌組織PDGFR的含量。
　　結(jié)果:全部5/6腎大部切除大鼠尾動脈收縮壓第7周始同sham組比較有顯著升高。ARB組微動脈血壓升高

7、幅度明顯低于NX組;ARB組大鼠SCr、BUN水平升高幅度明顯低于NX組;纈沙坦組和NX組的心肌病理檢測顯示，兩組大鼠的心肌細胞均表現(xiàn)為肥大，排列紊亂，細胞間質(zhì)明顯增多。但是纈沙坦組病變程度較NX組輕，治療組的Rona評分也低于對照組，差異有顯著性，P＜0.05。免疫組化指數(shù)評分結(jié)果表明，ARB組和NX組的PDGFR表達水平均顯著高于sham組，ARB組的PDGFR表達水平均明顯低于NX組，差異有顯著性，P＜0.05;Western B

8、lot結(jié)果表明，ARB組和NX組的PDGFR表達水平均顯著高于sham組，差異有顯著性，P＜0.05。ARB組的PDGFR表達水平均明顯低于NX組，差異有顯著性，P＜0.05。
　　結(jié)論:尿毒癥心肌病模型大鼠的心肌存在明顯的組織學(xué)損害;心肌局部炎癥介質(zhì)PDGFR的表達水平明顯升高，提示PDGF及其受體參與尿毒癥心肌病大鼠的心肌損害;應(yīng)用ARB纈沙坦治療的大鼠心肌損害明顯輕于未用藥的對照組，纈沙坦治療的大鼠心肌PDGFR的表達水平也

9、明顯低于對照組，提示PDGF及其受體介導(dǎo)的尿毒癥心肌損害，部分是通過AngⅡ及其1型受體途徑實現(xiàn)的。
　　第二部分 血管緊張素Ⅱ1型受體拮抗劑對維持性血液透析患者血漿血小板源性生長因的水平的影響
　　目的:選取原發(fā)病為單純腎臟疾病的血液透析患者，給予患者血管緊張素Ⅱ1型受體拮抗劑(ARB)治療，在血壓沒有較大波動的情況下，觀察患者的心臟功能以及血清PDGF水平的變化，判斷較大劑量的ARB是否能改善這部分血液透析患者的心臟功能

10、;炎癥介質(zhì)PDGF是否也隨之波動。
　　方法:41例原發(fā)腎臟病且規(guī)律血液透析的患者，隨機分為兩組:纈沙坦治療組（治療組），n=22;對照組，n=19;治療組患者在降壓藥種類里均包括纈沙坦（無其它種類RASI）;對照組降壓藥內(nèi)不含RASI中的任何一種，其余種類降壓藥以及用量適當增減，以達到對照組和治療組相匹配的血壓，觀察時間為3個月。采用ELISA方法，檢測治療組和對照組在實驗前后血清PDGF水平。
　　結(jié)果:經(jīng)過3個月較大劑

11、量的纈沙坦口服，治療組的LVEDD、EF以及A/E等指標相比較于對照組，均有不同程度改善，其中治療組的EF值明顯高于對照組，P＜0.05。纈沙坦治療組治療后血清PDGF水平明顯下降，同治療前比較差異有顯著性，P＜0.05。對照組3個月觀察期前后，血清PDGF水平?jīng)]有明顯變化，差異沒有顯著性，P＞0.05。
　　結(jié)論:尿毒癥心肌病的患者血清PDGF水平明顯升高，應(yīng)用纈沙坦治療后，血清PDGF水平同心臟EF值的改善同步下降，提示血清P