枸杞多糖對實驗性大鼠視網(wǎng)膜光損傷的防護及其機制研究.pdf

1、第一部分實驗性大鼠視網(wǎng)膜光損傷病理形態(tài)學及功能研究 [目的]建立大鼠視網(wǎng)膜光損傷模型，探討慢性視網(wǎng)膜光損傷模型中視網(wǎng)膜組織形態(tài)學及功能改變。 [方法]通過2000Lux白色冷光源對Sprague-Dawley(SD)大鼠進行24小時持續(xù)照射，建立視網(wǎng)膜光損傷模型。分別取正常對照組(CON)、光照后1天組(D1)、6天組(D6)、14天組(D14)視網(wǎng)膜通過組織病理學觀察視網(wǎng)膜形態(tài)學改變；視網(wǎng)膜電圖(electroreti

2、nogram，ERG)檢測視網(wǎng)膜功能。 [結(jié)果]1、形態(tài)學檢查：CON組視網(wǎng)膜形態(tài)正常，結(jié)構(gòu)層次清楚，內(nèi)外節(jié)排列整齊規(guī)則，外核層排列整齊，約有12-13個細胞核厚度，染色均勻。D1組損傷較重，光感受器外節(jié)膜盤疊狀結(jié)構(gòu)解離，內(nèi)節(jié)線粒體腫脹、空泡變性，外核層變薄、排列紊亂，約5-6個胞核厚度，可見較多染色質(zhì)濃染及細胞核固縮；D6組外節(jié)水腫變性，內(nèi)節(jié)線粒體整齊絲狀排列但仍較疏松，外核層變薄，約6-7個胞核厚度，細胞間隙增大，部分染色質(zhì)

3、濃染及固縮；D14組內(nèi)外節(jié)基本正常，外核層變薄，約6-7個胞核厚度，未見明顯凋亡細胞。各組視網(wǎng)膜色素上皮層、內(nèi)核層、節(jié)細胞層未見明顯病理改變、炎癥及壞死細胞。 2、視網(wǎng)膜功能學檢查：正常大鼠ERG暗視混合反應(yīng)b波振幅為267.667±96.256μv。光照后視網(wǎng)膜功能明顯受損，b波振幅明顯下降，光照后1天、6天和14天分別為光照前的29.97％、30.35％和33.08％。 [結(jié)論]2000Lux白光持續(xù)照射24小時造成

4、視網(wǎng)膜慢性光損傷，導(dǎo)致細胞凋亡為主的退行性改變，且損傷主要累及光感受器。引起視網(wǎng)膜功能的明顯下降。 第二部分枸杞多糖對大鼠視網(wǎng)膜光損傷的防護機制[目的]探討枸杞多糖對實驗性大鼠視網(wǎng)膜光損傷的防護作用，并探討其相關(guān)分子機制。 [方法]SD大鼠隨機分為3組：正常對照組、陽性對照組、枸杞多糖治療組。通過2000Lux白色冷光源對SD大鼠進行24小時持續(xù)照射，建立視網(wǎng)膜光損傷模型。給藥方法采用腹腔注射，于光照前24h及光照前30

5、min2次用藥。觀察視網(wǎng)膜組織形態(tài)學改變；ERG檢查視網(wǎng)膜功能；檢測視網(wǎng)膜超氧化物歧化酶(superocidedisnutase，SOD)活力及丙二醛(Malondialdehyde，MDA)和一氧化氮(NitricOxide，NO)的含量；半定量RT-PCR檢測c-fos基因表達水平。 [結(jié)果]1、形態(tài)學檢查：陽性對照組光感受器內(nèi)外節(jié)排列紊亂，分界不清，外節(jié)膜盤疊狀結(jié)構(gòu)解離，呈空泡狀變性，內(nèi)節(jié)線粒體腫脹、內(nèi)嵴增寬，外核層水腫、

6、變性、變薄，約5-6個胞核厚度，染色質(zhì)聚集，核膜皺縮，可見較多染色質(zhì)濃染及凋亡細胞。枸杞多糖治療組視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)清晰，內(nèi)外節(jié)分界清楚，外核層排列整齊，約10-11個胞核厚度，未見明顯凋亡細胞改變。 2、ERG檢查：正常大鼠ERG暗視混合反應(yīng)b波振幅為267.667±96.256μv，陽性對照組b波振幅下降到光照前的30.35％，枸杞多糖治療組b波振幅升高到61.49％(P＜0.01)。 3、SOD、MDA、NO檢測：正常組S

7、OD4.180±0.480U/gprot，陽性對照組SOD活力下降(P＜0.01)，枸杞多糖治療組與陽性對照組對比其SOD活力明顯升高(P＜0.01)。正常對照組MDA、NO含量分別為0.142±0.018nmol/mgprot，0.284±0.049umol/gprot，陽性對照組MDA、NO含量明顯升高(P＜0.01)，而枸杞多糖治療組與陽性對照組對比，其MDA、NO含量明顯下降(P＜O.01)。 4、RT-PCR檢測：正常