A族鏈球菌emm基因序列分型與生物膜相關(guān)性研究.pdf

1、研究背景:A族乙型溶血性鏈球菌(gxoup A streptococcus pyogens,GAS)是鏈球菌中致病性較強(qiáng)的一種細(xì)菌,是上呼吸道感染的重要致病原,可以引起急性扁桃體炎、猩紅熱和膿皰瘡,也可引起嚴(yán)重的侵襲性感染如敗血癥、壞死性筋膜炎和鏈球菌中毒休克綜合征。由emm基因編碼M蛋白是GAS的主要致病因子,M蛋白抗原變異是M分型的基礎(chǔ)。到目前為止,根據(jù)M蛋白抗原特異性可將GAS分為100多個(gè)型別,不同的型別其致病性不同,部分菌株感

2、染可引起嚴(yán)重并發(fā)癥如風(fēng)濕熱/風(fēng)濕性瓣膜性心臟病(RF/RnD)及急性腎小球腎炎等。
　　 生物膜(biofilm formation,BF)是一種包裹于細(xì)胞外多聚物基質(zhì)中不可逆的黏附于非生物或生物表面的微生物細(xì)胞菌落,是細(xì)菌、真菌在生長(zhǎng)過(guò)程中為適應(yīng)生存環(huán)境而形成的一種與浮游細(xì)胞相對(duì)應(yīng)的生存方式。生物膜被認(rèn)為是各種致病菌的毒力因子,能夠幫助細(xì)菌逃避抗生素或機(jī)體免疫系統(tǒng)的作用,引起許多細(xì)菌性疾病,像心內(nèi)膜炎、骨髓炎、齲齒、中耳炎、醫(yī)

3、療器械相關(guān)感染、眼窩植入物感染、囊性纖維化病人的肺部感染等,造成機(jī)體持續(xù)性感染或免疫性疾病。
　　 目前,對(duì)生物膜研究最多的是表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌,變形鏈球菌、格氏鏈球菌等。近些年來(lái),國(guó)外已經(jīng)有大量的實(shí)驗(yàn)證實(shí)GAS可以形成生物膜,且不同的emm基因型所形成的生物膜存在差異性。但中國(guó)目前還沒(méi)有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。
　　 目的:了解重慶地區(qū)A組乙型溶血性鏈球菌生物膜生長(zhǎng)情況,了解GAS emm基因分型與生物膜

4、的相關(guān)性。
　　 方法:對(duì)我院2000～2009收集的20株A族乙型溶血性鏈球菌培養(yǎng)、進(jìn)行聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增并測(cè)序,對(duì)emm基因進(jìn)行分型。培養(yǎng)GAS及變形鏈球菌UA159的生物膜,并測(cè)量生物膜的吸光率。
　　 結(jié)果:
　　 (一)A組溶血鏈球菌的emm分型:
　　 20株GAS菌株的emm分型分別為emm12.0、emm1.0、emm22.0、emm6.5和emm12.43、emm63.0、emm

5、3.1、emm80.0、emm12.4、emm75.0、emm12.21、emm6.0、emm102.2、emmst181.5、emm st38
　　 (二)生物膜情況
　　 所有的15個(gè)emm基因型與陽(yáng)性對(duì)照組(變形鏈球菌ua159)均可產(chǎn)生生物膜(p＜0.005).但不同的型別所形成的生物膜存在差異性。其中emmst38和emm12.43生物膜的生成能力要強(qiáng)于陽(yáng)性對(duì)照,Emm12.0和emm75.0生物膜最弱。