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1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文血鏈球菌鑒定及與冠心病的相關(guān)性研究姓名:張衛(wèi)東申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):口腔醫(yī)學(xué)(口腔內(nèi)科)指導(dǎo)教師:陳暉2002.4.1魚(yú)塑堊查堂堡主堂垡墮蘭的變化相一致,推測(cè)其通過(guò)誘導(dǎo)血小板血栓形成、纖維蛋白積聚及組織因子表達(dá),來(lái)達(dá)到損害心瓣膜及血管的作用夕鑒于血鏈球菌在口腔和心血管疾病中的作用,本課題對(duì)血鏈球菌基因鑒定及與冠心病的相關(guān)性進(jìn)行了初步研究,以求能部分闡明其在心血管疾病中的作用。, f 方法: 本實(shí)驗(yàn)中采用下述方法對(duì)血
2、鏈球菌進(jìn)行研究:應(yīng)用3 種不L同方法( 水煮法、C h e l e x l 0 0 裂解法和酚氯仿法) 提取血鏈球菌D N A ,根據(jù)隨意引物聚合酶鏈反應(yīng)( A P —P C R ) 擴(kuò)增后的電泳條帶對(duì)血鏈球菌進(jìn)行基因鑒定:利用血瓊脂培養(yǎng)基、血鏈球菌選擇性培養(yǎng)基及全自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀對(duì)冠心病人唾液及齦上菌斑中的血鏈球菌進(jìn)行計(jì)數(shù)及鑒定;運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)( E L I S A ) 間接法測(cè)定冠心病人血清中的血鏈球菌抗體及效價(jià);運(yùn)用血小板聚集
3、反應(yīng)儀測(cè)定不同血鏈球菌誘導(dǎo)人血小板體外聚集的能力。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)運(yùn)用S P S S 統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行分析。結(jié)果:同種細(xì)菌采用3 種不同D N A 提取法,經(jīng)A P —P C R 擴(kuò)增,可以得到相似的電泳條帶:冠心病組口腔唾液及齦上菌斑中血鏈球菌活菌數(shù)和血鏈球菌/高氏鏈球菌的檢出陽(yáng)性率均明顯高于對(duì)照組,但口腔鏈球菌和緩癥鏈球菌的檢出陽(yáng)性率在兩組間無(wú)明顯差異:冠心病組和對(duì)照組血清中均存在血鏈球菌抗體,且抗體效價(jià)無(wú)顯著差異:5 種m 鏈球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株
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