rAdinbitor的抗腫瘤作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究源于白眉蝮蛇的去整合素rAdinbitor的抗腫瘤作用，并探討其抑制腫瘤生長(zhǎng)作用的機(jī)制，為其以后的臨床試驗(yàn)提供必要的實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。
　　 方法：大量培養(yǎng)含有前期已構(gòu)建好的rAdinbitor基因的E. coli BL21，超聲破碎細(xì)菌后，提取菌體總蛋白，利用His-BindColumn親和層析技術(shù)對(duì)rAdinbitor進(jìn)行純化。用18％Tricine-SDS-PAGE對(duì)提取的總蛋白和純化后的rAdinbitor進(jìn)行鑒

2、定。將80只BALB/C小鼠隨機(jī)分為口服給藥組和肌肉注射兩組，雌雄各半。每組再隨機(jī)分為5小組，也雌雄各半。每只小鼠右腋皮下接種1×106個(gè)H22肝癌細(xì)胞以制備肝癌小鼠模型。rAdinbitor的治療劑量分別為0.5mg/kg體重、1.25mg/kg體重和5mg/kg體重，陰性對(duì)照組給予生理鹽水(0.2ml/kg體重)，陽(yáng)性對(duì)照組給予重組人血管內(nèi)皮抑素（1.65mg/kg體重）。每天給藥一次。實(shí)驗(yàn)第21天處死動(dòng)物，取瘤稱重。鏡下觀察HE染

3、色的腫瘤組織切片，并計(jì)數(shù)血管數(shù)量。
　　 結(jié)果：rAdinbitor在E.coli BL21中得到高表達(dá)。通過(guò)His-BindColumn親和層析獲得大量純化的rAdinbitor蛋白。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示，與生理鹽水陰性對(duì)照組相比，純化的rAdinbitor各劑量組的瘤重和血管數(shù)明顯下降，有顯著性差異（P＜0.05）；與重組人血管內(nèi)皮抑素組相比各治療組無(wú)明顯差異。
　　 結(jié)論：純化的蛇源rAdinbitor對(duì)H22肝癌細(xì)胞的生