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文檔簡介
1、目的:篩選沙苑子乙醇提取物抗癌有效部位,研究其體內(nèi)外抗腫瘤作用及機(jī)制。 方法: ①SMMC7721、BGC823、HL60、A549、Hela為實(shí)驗(yàn)瘤株,用MTT法檢測沙苑子提取物各部位對腫瘤細(xì)胞增殖的抑制作用;采用小鼠S180實(shí)體瘤模型,觀察沙苑子提取物各部位體內(nèi)抑瘤作用。 ②用MTI法、<'3>H-TdR摻入法觀察沙苑子抗癌有效部位的體外抑瘤作用。 ③采用小鼠肝癌細(xì)胞株H22復(fù)制荷瘤小鼠模型,進(jìn)一步觀
2、察沙苑子抗癌有效部位體內(nèi)抑瘤作用。 ④采用Giemsa染色、Hochest染色、透射電鏡等觀察給藥后細(xì)胞的形態(tài)變化;瓊脂糖凝膠電泳分析DNA的片段化:流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期及凋亡率的變化,并檢測藥物對caspase-3酶活性的影響。 ⑤觀察給藥后小鼠脾指數(shù)、胸腺指數(shù)的變化;進(jìn)行血常規(guī)分析,觀察藥物對小鼠外周血的影響;采用MTT法檢測藥物對小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖和NK細(xì)胞活性的影響。 結(jié)果: ①篩選結(jié)果表明沙苑
3、子黃酮(FAC)是沙苑子抗腫瘤的主要有效部位。 ②沙苑子黃酮可明顯抑制SMMC7721、HepG2、Hepal-6的體外增殖,最高抑制率分別87.15%、55.93%、62.22%。 ③沙苑子黃酮可明顯抑制1-122腫瘤細(xì)胞體內(nèi)增殖,最高抑制率均在60%左右。 ④Giemsa染色、Hochest染色、透射電鏡等均可觀察到給藥組部分細(xì)胞出現(xiàn)凋亡特征;經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳分析可見給藥組細(xì)胞呈現(xiàn)較為明顯的梯形條帶;流式分析
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