金龜子綠僵菌UV-0025的選育、發(fā)酵條件及應(yīng)用研究.pdf

1、綠僵菌(Metarhiziumanisopliae)是害蟲微生物防治中一種經(jīng)典的絲孢類昆蟲病原真菌，因用途廣泛、生產(chǎn)和應(yīng)用性能優(yōu)越而倍受關(guān)注，本研究目的是以研究室保存的金龜子綠僵菌菌株98105為出發(fā)菌株，通過紫外線誘變，篩選出低溫條件下萌發(fā)率較高的菌株；對獲得的誘變株進(jìn)行產(chǎn)孢條件的優(yōu)化；同時研究綠僵菌制劑劑型及其對蝗蟲的殺蟲效果，以求克服綠僵菌作為生物農(nóng)藥的弱點，為綠僵菌大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。 根據(jù)綠僵菌能在篩選培養(yǎng)基上形

2、成水解透明圈的特點，出發(fā)菌株98105經(jīng)紫外線誘變選育出低溫條件下萌發(fā)率高且遺傳性能穩(wěn)定的菌株UV-0025，對蝗蟲的毒力LT50是5.19天，比出發(fā)菌株98105縮短4.54天。UV-0025在低溫條件下保持較高的萌發(fā)率，16℃保持65.24﹪，并且具有抗紫外線照射的能力，在紫外線照射6小時后，仍能保持30.29﹪的萌發(fā)率。 綠僵菌的培養(yǎng)采用液-固兩相發(fā)酵法，液體種子最佳生長pH在6.5-7.0之間，最適溫度25℃，培養(yǎng)時間4

3、8h。固體培養(yǎng)最佳配方：大米∶麩皮∶谷殼=5∶4∶1，料水比為1∶0.9，添加葡萄糖0.8﹪、硫酸銨2.0﹪、磷酸二氫鉀1.2﹪。最適培養(yǎng)PH值為5.5-6.5，最佳培養(yǎng)溫度25℃，10﹪的接種量，培養(yǎng)周期9-11天。產(chǎn)孢量達(dá)到14.1×109/克培養(yǎng)基。 綠僵菌孢子貯藏穩(wěn)定性研究表明，孢子在60℃以下具有良好的穩(wěn)定性。對本研究研制的綠僵菌油劑的載體及溶劑油和其它助劑進(jìn)行了改進(jìn)和優(yōu)化。產(chǎn)品劑型配方為孢子粉與載體白碳黑以1∶1的比