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1、乳糖酶，學(xué)名為β-D-半乳糖苷酶，能夠特異性的水解β-D-半乳糖苷鍵，催化乳糖水解，生成葡萄糖和半乳糖。乳糖酶的應(yīng)用范圍非常廣泛，它能夠水解牛奶及乳制品中的乳糖，減少乳糖不耐癥的發(fā)生;可以用于改良乳制品;用于分析檢測等。目前工業(yè)上生產(chǎn)的乳糖酶成本高，本研究利用基因工程技術(shù)，嘗試在大腸桿菌和畢赤酵母中表達外源的乳糖酶，對乳糖酶的酶學(xué)性質(zhì)進行研究，發(fā)酵條件進行優(yōu)化，得到如下結(jié)論:
1)分別成功構(gòu)建了pETDuet-1-1ac4，p
2、MAL-c2x-lac4，pET22b(+)-lac4，pET28a(+)-lac4四種不同質(zhì)粒，并對其進行誘導(dǎo)表達，其中pET22b(+)-lac4重組質(zhì)粒的乳糖酶的酶活達到最高2.121 U·mL-1發(fā)酵液。
2)測定了pET22b(+)-lac4的重組酶的酶學(xué)性質(zhì)，乳糖酶的最適pH7.0，最適宜溫度為45℃，在45℃保存4h酶活依然在80％以上，K+對于乳糖酶酶活基本沒有影響，Mn2+，Ca2+濃度為分別為15mM，25
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