米曲霉生產(chǎn)乳糖酶的研究.pdf

1、對米曲霉菌株LAO-0703生產(chǎn)乳糖酶進行相關(guān)的研究，包括種子培養(yǎng)時間和種子培養(yǎng)基的優(yōu)化、液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化、液態(tài)發(fā)酵條件的優(yōu)化、固態(tài)發(fā)酵和基本酶學性質(zhì)的分析。
　　麩皮粉含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，可有效的促進菌體的生長。通過對種子培養(yǎng)相關(guān)營養(yǎng)素的單因素試驗和正交試驗，確定了種子培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)時間為11h，最佳種子培養(yǎng)基組分為:麩皮粉2.00％，葡萄糖2.50％，酵母粉2.00％，KH2PO40.75％。在此條件下菌體濕重可達到14.

2、61g。
　　米曲霉乳糖酶是誘導酶，在誘導因子的作用下可有效的提高酶活力，通過對米曲霉乳糖酶的研究，發(fā)現(xiàn)麩皮粉和桔皮粉對乳糖酶有很好的誘導作用，可顯著提高酶活力。
　　米曲霉生產(chǎn)的乳糖酶是胞外酶，無需破壁就能進行酶的分離提取，這種乳糖酶既可以采用固態(tài)培養(yǎng)也可以采用液態(tài)深層培養(yǎng)來生產(chǎn)。在培養(yǎng)過程中酶分泌到培養(yǎng)基中，發(fā)酵成本低，分離提取較為方便。通過對液態(tài)發(fā)酵產(chǎn)酶相關(guān)的單因素及正交試驗，確定出液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基的最佳組分為:乳糖1.

3、1％，蛋白胨0.5％，KH2PO42.0％，麩皮粉1.5％，桔皮粉1.0％。最佳發(fā)酵條件為:接種量10％，培養(yǎng)溫度30℃，初始pH5.5，裝液量50ml/250ml，搖床轉(zhuǎn)數(shù)180r/min，培養(yǎng)時間4d。在此條件下的液態(tài)發(fā)酵產(chǎn)酶，可使乳糖酶的酶活力高達2348U/L，比出發(fā)菌株的酶活力提高了15.6倍。
　　在對液態(tài)發(fā)酵過程中也對固態(tài)發(fā)酵做了簡單的改進，在固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基中添加了適量的營養(yǎng)物質(zhì)使酶活力達到8.18U/g，提高了9％

4、。用固態(tài)發(fā)酵法產(chǎn)酶，雖然設備要求比較簡單，易于推廣，而且不易破壞酶的結(jié)構(gòu)，但其缺點是容易污染雜菌;而液態(tài)發(fā)酵法相對來比較容易控制，可減少雜菌的污染，而且生產(chǎn)效率高，所以目前乳糖酶的生產(chǎn)主要還是采用液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)法。
　　為能更好的利用和保存該乳糖酶，故對此酶的基本酶學性質(zhì)進行了相關(guān)的研究。結(jié)果表明:該乳糖酶的最適反應溫度為55℃，表明此酶為高溫乳糖酶，在此溫度下可有效防止雜菌的污染;雖然在50℃下放置2h殘留的酶活力還能達到90％以