CAR在DCM猝死患者心肌中的表達(dá)及意義.pdf

1、研究背景:
　　擴(kuò)張型心肌病(dilated cardiomyopathy DCM)是一種病因不明，主要病理改變?yōu)樽笮氖仪粩U(kuò)張或雙側(cè)心腔擴(kuò)張，伴或不伴心肌收縮、舒張期功能障礙，臨床表現(xiàn)主要表現(xiàn)為心衰或心律紊亂，部分患者首發(fā)癥狀表現(xiàn)為死亡，需經(jīng)法醫(yī)尸檢證實(shí)系擴(kuò)張型心肌病導(dǎo)致的猝死，故擴(kuò)張型心肌病是法醫(yī)學(xué)研究的重點(diǎn)之一。
　　目前對(duì)DCM的病因不明，發(fā)病機(jī)制不清，主要有基因遺傳學(xué)說、病毒感染學(xué)說及自身免疫學(xué)說等。病毒感染學(xué)說為多

2、數(shù)研究人員認(rèn)可。
　　柯薩奇病毒(coxsackie virus，CV)及腺病毒(adenovirus，ADV)的對(duì)心肌的感染以及在心肌中的表達(dá)與猝死的關(guān)系目前沒有較為確切的研究。因此，在檢案中明確診斷DCM在法醫(yī)學(xué)研究中尤為重要，這對(duì)解決醫(yī)療糾紛及社會(huì)穩(wěn)定有著積極意義。另外通過檢案中采集的心臟標(biāo)本進(jìn)行病理學(xué)、免疫學(xué)及蛋白表達(dá)的分析，探討病毒感染在DCM形成中的作用及對(duì)心肌影響，也對(duì)臨床治療該疾病有著指導(dǎo)意義。
　　目的:通

3、過DCM、心肌炎(Myocarditis，MC)及正常人心肌標(biāo)本的病理學(xué)、免疫學(xué)及蛋白表達(dá)情況檢測(cè)，分析柯薩奇病毒及腺病毒在感染心肌對(duì)心肌細(xì)胞功能影響情況。
　　方法:搜集DCM死亡患者29例、MC死亡患者20例和非心源性意外死亡20例心臟標(biāo)本。每例患者心臟分別取材，經(jīng)10％福爾馬林固定，部分新鮮標(biāo)本存放在-80°冰箱保存。10％福爾馬林固定的組織經(jīng)過包埋、脫水后HE染色、特殊染色(Masson三色染色)及免疫組化特異CAR蛋白檢

4、測(cè)分析;-80°冰箱保存的組織通過Western blotting檢測(cè)柯薩奇-腺病毒受體表達(dá)量的大小。研究柯薩奇病毒及腺病毒存在情況及相應(yīng)受體蛋白在心肌中的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　一、HE染色結(jié)果顯示DCM組部分心肌細(xì)胞肥大，部分心肌細(xì)胞萎縮，心肌間質(zhì)纖維結(jié)締組織增生;MC組心肌細(xì)胞壞死，心肌間質(zhì)淋巴細(xì)胞及中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，主要以淋巴細(xì)胞為主;
　　二、特殊染色(Masson三色染色)可見DCM組心肌間質(zhì)大量藍(lán)色纖維

5、組織增生;MC及對(duì)照組未見明顯差異;
　　三、免疫組化顯示DCM組19例及MC組8例均可見紅色顆粒(AEC顯色)沉積于心肌細(xì)胞漿內(nèi)，余心肌組織未見陽(yáng)性顆粒沉積;免疫組化圖片通過IPP軟件分析，DCM組IOD值為6.646±0.155，MC組IOD值為6.206±0.326，對(duì)照組IOD值為0.123±0.037，DCM組及MC組無明顯差異(P＞0.05)，DCM組、MC組與對(duì)照組有明顯差異(P＜0.05)。
　　四、West

6、ern blotting顯示CAR在DCM組及MC組均明顯升高。
　　結(jié)論:通過研究表明，29例DCM猝死患者中有19例(占65.51％)患者心肌細(xì)胞萎縮、壞死及纖維化改變，心肌間質(zhì)纖維化。通過Westernblotting檢測(cè)心肌中到柯薩奇-腺病毒受體表達(dá)明顯高于對(duì)照組。因此，部分DCM可能系柯薩奇及腺病毒感染引起，并且病毒在心肌中的復(fù)制嚴(yán)重程度直接決定心肌功能，通過纖維化的程度及炎癥作用很可能是導(dǎo)致心源性猝死的原因。另外，部分