慢性乙型病毒性肝炎脾虛濕熱證差異microRNA的研究.pdf

1、目的：
　　1、研究慢性乙型病毒性肝炎脾虛濕熱證與microRNA之間的相關(guān)性，篩選慢性乙肝脾虛濕熱證的潛在差異microRNA，探討慢性乙肝脾虛濕熱證的生物學(xué)本質(zhì)，為中醫(yī)辨證的客觀化提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　2、研究中藥治療慢性乙肝脾虛濕熱證的臨床療效與microRNA間的關(guān)系，篩選慢性乙型病毒性肝炎脾虛濕熱證治療組與對(duì)照組的潛在差異microRNA，以期為中醫(yī)臨床療效評(píng)價(jià)提供客觀依據(jù)。
　　方法：
　　運(yùn)用基因芯片

2、技術(shù)，對(duì)臨床采集的慢性乙肝脾虛濕熱組、脾虛濕熱治療組與藥物對(duì)照組、無證可辨組及健康志愿者進(jìn)行microRNA檢測(cè)，觀察脾虛濕熱證與無證可辨、健康對(duì)照組間潛在差異表達(dá)的microRNA及脾虛濕熱治療組與藥物對(duì)照組間潛在差異表達(dá)的microRNA，采用SPSS20.0系統(tǒng)對(duì)所得的計(jì)數(shù)資料、計(jì)量資料進(jìn)行分析，并運(yùn)用SAS系統(tǒng)對(duì)慢性乙肝脾虛濕熱證的潛在差異microRNA、脾虛濕熱治療組與藥物對(duì)照組間的潛在差異microRNA進(jìn)行篩選及功能分析

3、。
　　結(jié)果：
　　1、脾虛濕熱組和健康對(duì)照組比較，共篩選出差異表達(dá)的microRNA162條，121條高表達(dá)，41條低表達(dá)，其中具有顯著差異的microRNA78條（P≤0.05，F(xiàn)C>2倍），60條高表達(dá)，18條低表達(dá)。
　　2、無證可辨組和健康對(duì)照組比較，共篩選出差異microRNA116條，90條高表達(dá)，26條低表達(dá)，其中具有顯著差異的microRNA35條（P≤0.05，F(xiàn)C>2倍），28條高表達(dá)，7條低表達(dá)

4、。
　　3、脾虛濕熱證的差異microRNA共有17條（P＜0.05；FC>2.0倍），均為高表達(dá)，對(duì)其進(jìn)行靶基因預(yù)測(cè)，功能涉及核心啟動(dòng)子、MAPK、醛固酮合成和分泌、TGF-beta等。
　　4、脾虛濕熱治療組與藥物對(duì)照組比較，共篩選出差異microRNA132條，43條高表達(dá)，90條低表達(dá)，其中具有顯著差異的microRNA3條（P≤0.05，F(xiàn)C>2倍），1條高表達(dá)，2條低表達(dá)。對(duì)其進(jìn)行靶基因預(yù)測(cè)，miR-4459共涉

5、及57340條、miR-3188共涉及58292條、miR-5196共涉及59233條，功能與14-3-3蛋白結(jié)合、網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞作用、β-連環(huán)蛋白綁定等相關(guān)。
　　結(jié)論：
　　1、慢性乙肝脾虛濕熱證的潛在差異microRNAs為：miR-378a-3p、miR-1275、miR-320a、miR-3188、miR-4455、miR-3676-5p、miR-3141、miR-494、miR-4707-5p、miR-474