TLR4-TRIF途徑在肝硬化大鼠不同入肝血流阻斷方法下肝缺血再灌注損傷中的意義.pdf

1、目的：
　　 在肝硬化大鼠基礎(chǔ)上，復(fù)制保留半肝動脈血供的入肝血流阻斷法、Pringle法和半肝血流阻斷法，制備肝臟缺血再灌注損傷模型，通過比較肝細(xì)胞中TLR4和TRIF的表達(dá)，以探討不同阻斷方法下其肝缺血再灌注損傷與TLR4/TRIF途徑的聯(lián)系。
　　 方法：
　　 將122只Wistar雄性大鼠用四氯化碳+酒精誘導(dǎo)建立肝硬化模型，成模106只，抽取其中96只肝硬化Wistar雄性大鼠隨機(jī)分為:Pringle法組

2、(PH組，n=32)、半肝血流阻斷法組（HH組，n=32）和保留半肝動脈血供的入肝血流阻斷法組(WH組，n=32)。每組又分為4個亞組，分別為再灌注后1h、3h、6h、24h，每亞組為8只。采用上述三種方法阻斷肝血流15min后，去血管夾恢復(fù)血流。分別于解除阻斷后1h、3h、6h、24h取材。Western Blot法檢測肝組織中TLR4蛋白的表達(dá)水平，免疫組化方法檢測TRIF的表達(dá)水平。統(tǒng)計資料表達(dá)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（(x)±s）表示，

3、數(shù)據(jù)用SPSS11.7統(tǒng)計軟件進(jìn)行處理，當(dāng)資料符合正態(tài)分布且方差齊性，采用One-Way ANOVA，如果檢驗結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)意義，進(jìn)一步用LSD檢驗進(jìn)行兩兩比較。當(dāng)資料不符合正態(tài)分布或方差不齊時，采用秩和檢驗;以上檢驗以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1.誘導(dǎo)12周后成功建立大鼠肝硬化模型106只，成模率86.9％。
　　 2.在不同時點(diǎn)，各組之間TLR4和TRIF再灌注后表達(dá)水平有所差異，W

4、H組、HH組均明顯低于PH組，P＜0.05，有統(tǒng)計學(xué)意義;WH組與HH組比較，P＞0.05，無統(tǒng)計學(xué)意義。再灌注后1h、3h各組TLR4和TRIF表達(dá)水平后逐漸上升，在6h達(dá)高峰，在24h表達(dá)水平已下降。
　　 3.在不同時點(diǎn)，各組之間TRIF再灌注后表達(dá)水平有所差異，WH組、HH組均明顯低于PH組，P＜0.05，有統(tǒng)計學(xué)意義;WH組與HH組比較，P＞0.05，無統(tǒng)計學(xué)意義。再灌注后各時點(diǎn)TRIF的表達(dá)趨勢變化與TLR4是一致的