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1、繁殖性狀是豬的重要經(jīng)濟(jì)性狀之一,母豬繁殖功能受下丘腦-垂體-卵巢軸的作用。卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,F(xiàn)SH)是重要的促性腺激素,通過卵泡刺激素受體(follicle-stimulating hormone receptor,F(xiàn)SHR)介導(dǎo)直接作用于卵巢調(diào)控動(dòng)物的繁殖活動(dòng)。許多研究成果提示,動(dòng)物FSHR基因的多態(tài)性與其生殖力間存在關(guān)聯(lián)。
本研究主要進(jìn)行了以下三個(gè)方面研究:
采
2、用PCR-SSCP以及直接測(cè)序技術(shù),分析了三個(gè)豬種分別為:皖南黑豬、巴克夏豬和巴克夏豬(♂)×皖南黑豬(♀)豬,F(xiàn)SHR基因第10外顯子多態(tài)性,并且分析了FSHR基因多態(tài)性與母豬產(chǎn)仔數(shù)的關(guān)系。
采用RT-PCR技術(shù),比較轉(zhuǎn)錄水平不同基因型皖南黑豬卵巢中FSHR基因及垂體中FSH-β基因和GnRHR基因的表達(dá)差異。
采用ELISA技術(shù),測(cè)定并分析不同基因型皖南黑豬血清中卵泡刺激素、雌二醇(E2)和孕酮(P)的水平差異。
3、
結(jié)果如下:
在豬FSHR第10外顯子上檢測(cè)到三個(gè)SNPs(C1491T,G1885A和C1977T),在C1491T位點(diǎn)檢測(cè)到三種基因型,G1885A和C1977T存在連鎖,并從中篩選出2個(gè)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的單倍型。對(duì)試驗(yàn)檢測(cè)到的SNPs和皖南黑豬、巴皖二元豬和巴克夏豬的產(chǎn)仔數(shù)和產(chǎn)活仔數(shù)進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析,結(jié)果顯示在FP3位點(diǎn)上,經(jīng)產(chǎn)及全部胎次皖南黑豬AB型個(gè)體的TNB和NBA均極顯著高于AA型(P<0.01);在FP5上
4、,初產(chǎn)及全部胎次巴克夏豬DE型及DD型的TNB和NBA均極顯著高于EE型(P<0.01);FP5上3種基因型個(gè)體的TNB和NBA的總體趨勢(shì)為:DE>DD>EE。結(jié)果說明FSHR第10外顯子多態(tài)性顯著影響皖南黑豬和巴克夏豬的產(chǎn)仔力。
FSHRmRNA在AB型皖南黑豬卵巢中顯著高于AA型(P<0.05)。FSH-βmRNA在AA型和AB型皖南黑豬垂體中差異不顯著。GnRHRmRNA在AB型皖南黑豬垂體中顯著高于AA型(P<0.05
5、)。
基因型為AB的母豬血液中雌二醇濃度顯著高于基因型為AA的母豬,AA型母豬血液中孕酮的濃度極顯著高于AB型母豬。FSH的濃度在AA型和AB型母豬血液中差異不顯著。
結(jié)果顯示,豬FSHR基因第10外顯子存在多個(gè)多態(tài)位點(diǎn),且每個(gè)多態(tài)位點(diǎn)均有3種基因型,豬基因型的不同與母豬產(chǎn)仔力存在相關(guān)性;不同基因型皖南黑豬豬卵巢中FSHR和垂體GnRHR在mRNA水平、血液中雌二醇和孕酮濃度存在差異。結(jié)果提示,F(xiàn)SHR多態(tài)性可能影響
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