PLIN基因多態(tài)性及其表達(dá)水平與肥胖關(guān)系的研究.pdf

1、肥胖是2型糖尿病、冠心病、高血壓及癌癥等多種慢性非傳染性疾病的重要危險(xiǎn)因素。近年來,肥胖呈全球流行態(tài)勢,已成為發(fā)達(dá)國家以及部分發(fā)展中國家所共同面臨的一個(gè)重要公共衛(wèi)生問題。肥胖是多種因素相互作用引起的綜合征,遺傳因素在肥胖發(fā)病中起到了關(guān)鍵作用。Perilipin是PLIN基因編碼的一種蛋白,該蛋白質(zhì)位于脂肪細(xì)胞內(nèi)脂滴的表面,調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞內(nèi)甘油三酯脂肪酶的轉(zhuǎn)運(yùn)?；A(chǔ)狀態(tài)下,非磷酸化的Perilipin在包圍在脂滴表面,阻止激素敏感性脂肪酶與

2、脂滴內(nèi)的甘油三酯接觸。刺激狀態(tài)下,Perilipin磷酸化,其所形成的“分子屏障”被打開,從而允許激素敏感性脂肪酶接觸并分解甘油三酯,提示Perilipin作為一種“分子開關(guān)”,直接參與脂質(zhì)代謝的分子調(diào)控,與脂質(zhì)代謝和肥胖密切相關(guān)。S.Mottagui-Tabar和Yanxin Wang關(guān)于PLIN基因表達(dá)水平的研究均顯示:肥胖者腹部皮下脂肪組織的Perilipin A蛋白的量和mRNA均顯著低于非肥胖者;Philip A在非糖尿病個(gè)體

3、中的研究則發(fā)現(xiàn),Perilipin mRNA與其蛋白的表達(dá)高度正相關(guān),Perilipin mRNA在肥胖個(gè)體中表達(dá)升高。這些關(guān)于PLIN基因表達(dá)水平的研究并未得出一致的結(jié)論,需要進(jìn)一步深入研究。人類PLIN基因被定位15q26.1,位于肥胖、糖尿病、高甘油三脂血癥的易感基因連鎖基因座區(qū)域。由于mRNA剪切方式不同,PLIN基因編碼A、B、C、D四種同源蛋白體,PerilipinA含量最高,特異性表達(dá)于脂肪細(xì)胞和類固醇生成細(xì)胞中,參與甘油

4、三酯的儲存和水解。PLIN基因存在單核苷酸多態(tài)性,研究表明,PLIN基因多態(tài)性與代謝綜合癥、肥胖、糖尿病及腰臀比、腰圍、血糖、甘油三酯、總膽固醇等肥胖相關(guān)指標(biāo)有關(guān)聯(lián)。但關(guān)于PLIN基因多態(tài)性與Perilipin表達(dá)水平之間關(guān)系的研究較少,僅有Mottagui-Tabar等對此做了初步研究,發(fā)現(xiàn)PLIN11482(rs894160)(A/G)與脂解和Perilipin蛋白量明顯相關(guān)。因此進(jìn)行PLIN基因多態(tài)性與Perilipin表達(dá)水平之

5、間關(guān)系的研究非常必要。
　　材料與方法：以河南省多家醫(yī)院收集到149名腹部手術(shù)病人為研究對象,采集其腹部皮下脂肪組織標(biāo)本、收集空腹抗凝血標(biāo)本并進(jìn)行問卷調(diào)查。通過問卷調(diào)查獲得研究對象人口統(tǒng)計(jì)學(xué)特征、行為危險(xiǎn)因素、膳食狀況的相關(guān)資料。通過人體測量收集到研究對象的身高、體重、腰圍、臀圍及血壓等指標(biāo)的水平,使用全自動生化分析儀檢測血糖和血脂。應(yīng)用Western blot方法檢測研究對象腹部皮下脂肪組織中Perilipin的表達(dá)水平,應(yīng)用P

6、CR-RFLP和Real-Time PCR技術(shù)進(jìn)行PLIN基因多態(tài)性位點(diǎn)的基因分型。應(yīng)用單因素方差分析或Wilcoxon秩合檢驗(yàn)對連續(xù)變量資料進(jìn)行組間比較。Pearson相關(guān)分析或Spearman秩相關(guān)分析用于分析Perilipin蛋白相對表達(dá)水平與其它指標(biāo)之間的關(guān)系。單因素和多因素Logistic回歸模型用于分析PLIN基因多態(tài)性與肥胖之間的關(guān)系,調(diào)整因素包括年齡、性別、經(jīng)濟(jì)收入、吸煙、飲酒、膳食及體力活動。協(xié)方差分析用于調(diào)整其它因素

7、后比較不同PLIN基因型之間肥胖相關(guān)指標(biāo)之間的差異。
　　結(jié)果：1.Perilipin蛋白相對表達(dá)水平與肥胖之間的關(guān)系研究對象腹部皮下脂肪組織中Perilipin蛋白相對表達(dá)水平Perilipin/actin的總體均數(shù)為1.02,其中正常組的均數(shù)為1.06,超重組均數(shù)為1.07,肥胖組均數(shù)為1.84,肥胖組Perilipin蛋白相對表達(dá)水平低于正常組(F=5.69,P=0.02)和超重組(F=5.47,P=0.02),超重組和正常

8、組之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在男性研究對象中,肥胖組的表達(dá)水平低于正常組(F=4.65,P=0.04)和超重組(F=6.21,P=0.02)。在女性研究對象中,3組研究對象的Perilipin相對表達(dá)水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(F=0.77,P=0.47)。男性和女性研究對象Perilipin蛋白相對表達(dá)水平的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.66,P=0.51)。Perilipin蛋白相對表達(dá)水平的性別差異在體重正常組(t=-0.66,P=0.51)、超

9、重組(t=1.18,P=0.24)及肥胖組(t=0.98.P=0.34)中均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。多因素Logistic回歸分析顯示,調(diào)整了年齡、性別、經(jīng)濟(jì)收入、吸煙、飲酒、膳食、體力活動等因素后,Perilipin/actin與肥胖呈負(fù)關(guān)聯(lián),其OR值(95％CI)為0.33(0.13-0.93)。在全體研究對象中,Perilipin/actin與人體測量指標(biāo)、肥胖相關(guān)指標(biāo)之間無相關(guān)關(guān)系(P>0.05)。在正常組和肥胖組,Perilipin/a

10、ctin與這些指標(biāo)之間均無相關(guān)關(guān)系(P>0.05);在超重組,Perilipin/actin與收縮壓(r=0.38,P=0.01)有正相關(guān)關(guān)系,與高密度脂蛋白有負(fù)相關(guān)關(guān)系(F=-0.34,P=0.03)。
　　2.PLIN基因多態(tài)性與肥胖的關(guān)系調(diào)整性別、年齡、經(jīng)濟(jì)收入、吸煙、飲酒、膳食及體力活動等因素的影響后,與PLIN14995(rs1052700)(A/T)位點(diǎn)T/T基因型相比,A/T基因型和A/A基因型研究對象肥胖患病危險(xiǎn)的

11、OR值(95％CI)分別為2.22(0.79-6.20)和1.37(0.33-5.75)。調(diào)整性別、年齡、經(jīng)濟(jì)收入、吸煙、飲酒、膳食及體力活動等因素的影響后,與PLIN11482(rs894160)(G/A)位點(diǎn)G/G基因型相比,A/A基因型研究對象患肥胖的危險(xiǎn)增加,OR值(95％CI)為4.93(1.09-22.28)。與PLIN11482(G/A)位點(diǎn)G等位基因攜帶者相比,A等位基因增加研究對象肥胖的患病危險(xiǎn),OR值(95％CI)為

12、3.12(1.08-9.03)。PLIN14995(A/T)位點(diǎn)和PLIN11482(G/A)位點(diǎn)各基因型之間的人體測量指標(biāo)、血脂、血糖及血壓水平的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　3.PLIN基因多態(tài)性與Perilipin蛋白相對表達(dá)水平之間的關(guān)系Perilipin蛋白相對表達(dá)水平在PLIN14995(A/T)位點(diǎn)基因型間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.88),在PLIN11482(G/A)位點(diǎn)基因型之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

13、P=0.71);Perilipin蛋白相對表達(dá)水平在PLIN14995(A/T)位點(diǎn)基因型間的差異在體重正常組(P=0.84)、超重組(P=0.76)、肥胖組(P=0.65)研究對象中均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;Perilipin蛋白相對表達(dá)水平在PLIN11482(G/A)位點(diǎn)基因型間的差異在體重正常組(P=0.99)、超重組(P=0.40)、肥胖組(P=0.96)研究對象中均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：1.肥胖患者腹部皮下脂肪組織中的Per