基于微流控系統(tǒng)的高通量蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選新方法研究.pdf

1、迄今，X射線晶體學(xué)是解析蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的主要研究手段，而獲得高質(zhì)量的蛋白質(zhì)晶體仍需要大量實驗的篩選。微流控技術(shù)因具有高通量、低耗費、集成化和促進結(jié)晶等優(yōu)勢，而為蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選提供了可靠的方法。
　　第一章闡述了蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選的主要方法、商品化的蛋白質(zhì)結(jié)晶平臺及發(fā)展趨勢;探討了目前基于微流控技術(shù)的蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選技術(shù)和所采用的方法;介紹了近幾年3D打印技術(shù)在微流控系統(tǒng)的應(yīng)用。
　　第二章中，我們發(fā)展了一種基于3D打印微孔陣列芯片和液

2、滴技術(shù)的納升級蒸氣擴散蛋白質(zhì)結(jié)晶和篩選方法。我們利用3D打印技術(shù)加工了具有不同體積微孔的微孔陣列芯片;發(fā)展了針對3D打印芯片內(nèi)部微孔隙的后處理技術(shù)和具有多層結(jié)構(gòu)的3D打印芯片密封體系，從而獲得完全密封的結(jié)晶微腔室;最終結(jié)合本實驗室的液滴操縱技術(shù)，實現(xiàn)了納升級蒸氣擴散蛋白質(zhì)結(jié)晶和篩選。其蛋白消耗量比常規(guī)體系下蒸氣擴散蛋白質(zhì)結(jié)晶每次試驗消耗的蛋白質(zhì)溶液降低了10-100倍。
　　第三章中，我們發(fā)展了一種蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選的新方法——高分辨