甲潑尼龍琥珀酸鈉鞘內(nèi)注射對大鼠急性脊髓損傷的修復(fù)作用及相關(guān)蛋白的影響.pdf

1、采用免疫組織化學(xué)方法檢測脊髓損傷(spinal cord injury，SCI)后各組不同時段生長相關(guān)蛋白-43(Growth associated protein43，GAP-43)和熱休克蛋白27(Heat shock protein27，HSP27)表達(dá)情況;各組大鼠在存活期間作后肢Basso Beattie Bresnahan(BBB)運動功能評分;用蘇木精-伊紅（hematoxyl in-eos in，HE）染色法觀察損傷的脊

2、髓組織各組不同時段病理變化。以確定甲潑尼龍琥珀酸鈉(Methylpredniolone Sodium Succinate，MPss)鞘內(nèi)注射后是否參與了脊髓神經(jīng)元內(nèi)GAP-43和HSP27表達(dá)的調(diào)節(jié)，進(jìn)一步闡明MPss鞘內(nèi)注射對急性SCI修復(fù)中的可能作用機(jī)制。
　　健康成年大鼠體重(210±10)g雌性大鼠90只，隨機(jī)分為治療組、觀察組、對照組，每組30只。治療組予以脊髓損傷后MPss3 mg/kg溶解于0.1 mL0.9％氯化鈉

3、中，鞘內(nèi)注射;觀察組予以單純手術(shù)暴露脊髓，不損傷脊髓;對照組予以脊髓損傷后0.9％氯化鈉0.1mL，鞘內(nèi)注射。于術(shù)后第1，3，7，14，28天進(jìn)行組織學(xué)觀察分析、行為學(xué)觀察。
　　組織學(xué)結(jié)果:顯示GAP-43在大鼠脊髓損傷后均表達(dá)增強(qiáng)，觀察組有少量表達(dá)。治療組、對照組均出現(xiàn)高表達(dá)，在脊髓損傷后1，3，7天表達(dá)強(qiáng)度逐漸上升，在第7天達(dá)到最高，后表達(dá)逐漸下降，對照組第14天降至接近對照組，第28天治療組、對照組表達(dá)均降至相同水平，但仍

4、稍高于觀察組。治療組在早期表達(dá)數(shù)量及表達(dá)強(qiáng)度均高于對照組，隨著時間延長，降至與觀察組相同水平。圖像分析結(jié)果顯示，治療組脊髓前角的陽性反應(yīng)在1，3，7，14d點高于對照組，3d差異最明顯，差異有顯著性(P＜0.05)。HSP27在對照組呈低水平表達(dá)，治療組及觀察組均在1d達(dá)到高峰，治療組在1，3d的陽性細(xì)胞數(shù)及陽性染色強(qiáng)度均強(qiáng)于對照組，后表達(dá)逐漸下降，治療組和對照組第7天降至接近觀察。治療組脊髓灰質(zhì)陽性細(xì)胞較對照組高，最明顯差別在術(shù)后1d

5、，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。
　　HE染色結(jié)果:治療組、對照組均可見脊髓組織內(nèi)細(xì)胞水腫、結(jié)構(gòu)紊亂、淋巴細(xì)胞浸潤尼氏體融解等病理變化，治療組病理改變輕于觀察組。觀察組脊髓結(jié)構(gòu)正常，無組織內(nèi)細(xì)胞水腫、結(jié)構(gòu)紊亂、淋巴細(xì)胞浸潤尼氏體融解等病理變化。脊髓組織HE染色結(jié)果表明，甲潑尼龍琥珀酸鈉鞘內(nèi)注射可減輕脊髓損傷后的病理改變結(jié)果行為學(xué)觀察:BBB評分提示甲潑尼龍琥珀酸鈉鞘內(nèi)注射可改善大鼠脊髓損傷后后肢運動功能，術(shù)后第7d，14d，2