甲強龍和IN-1聯(lián)合對大鼠急性脊髓損傷后Nogo-A和GAP-43表達及脊髓損傷修復的影響.pdf

1、目的:
　　通過觀察甲基強的松龍（MP）和IN-1（Nogo-A的單克隆抗體）單用和聯(lián)合治療分別對大鼠急性脊髓損傷后Nogo-A和神經生長相關蛋白43（GAP-43）表達的影響；探討MP和IN-1單用和聯(lián)合治療急性脊髓損傷的療效和可能機制。
　　方法:
　　采用改良Allens法建立大鼠急性脊髓損傷模型。將大鼠隨機分為A組（脊髓損傷組）、B組（脊髓損傷后甲強龍治療組）、C組（脊髓損傷后IN-1治療組）、D組（脊髓損傷后

2、甲強龍聯(lián)合IN-1治療組）.B組：首次30mg/kg的劑量靜脈內注射MP，繼之以5.4mg/kg/h的劑量給予23h；C組：蛛網膜下腔放置PE-10導管,經PE-10導管給予IN-1，25ul/次/d，連續(xù)7d；D組：首次30mg/kg的劑量靜脈內注射MP，繼之以5.4mg/kg/h的劑量給予23h，經PE-10導管給予IN-1，25ul/次/d，連續(xù)7d；A組用等量生理鹽水替代。于術后1d、3d、7d、14d、21d行BBB評分評價神

3、經功能、用HE染色觀察損傷后脊髓的形態(tài)學變化；免疫組化檢測Nogo-A和GAP-43的表達；WB檢測Nogo-A的表達。
　　結果:
　　1、BBB評分：B組、C組和D組評分高于A組，于3d、7d、14d及21d差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；B組、C組評分均低于D組，于7d、14d及21d差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；而B組和C組評分差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　2、HE染色：結果顯示A組早期組

4、織及細胞水腫最顯著，晚期疤痕最多，B、C組次之，D組變化最輕。
　　3、免疫組化：脊髓損傷后各實驗組各時間點損傷區(qū)域均有Nogo-A和GAP-43蛋白陽性表達。其中Nogo-A表達在損傷1d后開始增高，于7d表達最高，隨后下降；B組、C組和D組Nogo-A表達均低于A組，于1d、3d、7d、14d差異具有統(tǒng)計學意義(p<0.05)；D組Nogo-A表達低于B組和C組，于1d、3d、7d、14d差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；而

5、C組低于B組，于1d、3d、7d差異具有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。GAP-43表達在損傷后1d開始增高，于7d達到高峰，隨后下降；B組、C組和D組GAP-43表達高于A組，于3d、7d和14d差異具有統(tǒng)計學意義(p<0.05)；B與C組差異無統(tǒng)計學意義(p>0.05)；D組GAP-43表達高于B組和C組，于7d、14d差異具有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。
　　4、WB結果：在蛋白水平Nogo-A表達與免疫組化結果趨勢基本一致。N

6、ogo-A表達在損傷1d后開始增高，于7d表達最高，隨后下降；其中B組、C組和D組Nogo-A表達均低于A組，于1d、3d、7d、14d差異具有統(tǒng)計學意義(p<0.05)；D組Nogo-A表達低于B組和C組，于1d、3d、7d、14d差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；而C組低于B組，于1d、3d、7d、14d差異具有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。
　　結論:
　　1、大鼠急性脊髓損傷后Nogo-A和GAP-43表達均增高；其

7、中Nogo-A表達從1d開始增高，7d達到高峰，然后下降；GAP-43表達從1d開始增高，7d達到高峰，然后下降。
　　2、聯(lián)合組的Nogo-A的表達低于IN-1組、MP組和對照組；而聯(lián)合組的GAP-43A的表達高于IN-1組、MP組和對照組，且聯(lián)合組的BBB評分最高。
　　3、在治療急性脊髓損傷時，IN-1和MP有協(xié)同作用，其機制可能是：（1）在急性期協(xié)同抑制Nogo-A的表達；（2）在亞急性期，共同加強GAP-43蛋白等