甲強(qiáng)龍和IN-1聯(lián)合對(duì)大鼠急性脊髓損傷后Nogo-A和GAP-43表達(dá)及脊髓損傷修復(fù)的影響.pdf

1、目的:
　　通過(guò)觀察甲基強(qiáng)的松龍（MP）和IN-1（Nogo-A的單克隆抗體）單用和聯(lián)合治療分別對(duì)大鼠急性脊髓損傷后Nogo-A和神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43（GAP-43）表達(dá)的影響；探討MP和IN-1單用和聯(lián)合治療急性脊髓損傷的療效和可能機(jī)制。
　　方法:
　　采用改良Allens法建立大鼠急性脊髓損傷模型。將大鼠隨機(jī)分為A組（脊髓損傷組）、B組（脊髓損傷后甲強(qiáng)龍治療組）、C組（脊髓損傷后IN-1治療組）、D組（脊髓損傷后

2、甲強(qiáng)龍聯(lián)合IN-1治療組）.B組：首次30mg/kg的劑量靜脈內(nèi)注射MP，繼之以5.4mg/kg/h的劑量給予23h；C組：蛛網(wǎng)膜下腔放置PE-10導(dǎo)管,經(jīng)PE-10導(dǎo)管給予IN-1，25ul/次/d，連續(xù)7d；D組：首次30mg/kg的劑量靜脈內(nèi)注射MP，繼之以5.4mg/kg/h的劑量給予23h，經(jīng)PE-10導(dǎo)管給予IN-1，25ul/次/d，連續(xù)7d；A組用等量生理鹽水替代。于術(shù)后1d、3d、7d、14d、21d行BBB評(píng)分評(píng)價(jià)神

3、經(jīng)功能、用HE染色觀察損傷后脊髓的形態(tài)學(xué)變化；免疫組化檢測(cè)Nogo-A和GAP-43的表達(dá)；WB檢測(cè)Nogo-A的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1、BBB評(píng)分：B組、C組和D組評(píng)分高于A組，于3d、7d、14d及21d差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；B組、C組評(píng)分均低于D組，于7d、14d及21d差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；而B(niǎo)組和C組評(píng)分差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　2、HE染色：結(jié)果顯示A組早期組

4、織及細(xì)胞水腫最顯著，晚期疤痕最多，B、C組次之，D組變化最輕。
　　3、免疫組化：脊髓損傷后各實(shí)驗(yàn)組各時(shí)間點(diǎn)損傷區(qū)域均有Nogo-A和GAP-43蛋白陽(yáng)性表達(dá)。其中Nogo-A表達(dá)在損傷1d后開(kāi)始增高，于7d表達(dá)最高，隨后下降；B組、C組和D組Nogo-A表達(dá)均低于A組，于1d、3d、7d、14d差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)；D組Nogo-A表達(dá)低于B組和C組，于1d、3d、7d、14d差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；而

5、C組低于B組，于1d、3d、7d差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。GAP-43表達(dá)在損傷后1d開(kāi)始增高，于7d達(dá)到高峰，隨后下降；B組、C組和D組GAP-43表達(dá)高于A組，于3d、7d和14d差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)；B與C組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)；D組GAP-43表達(dá)高于B組和C組，于7d、14d差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。
　　4、WB結(jié)果：在蛋白水平Nogo-A表達(dá)與免疫組化結(jié)果趨勢(shì)基本一致。N

6、ogo-A表達(dá)在損傷1d后開(kāi)始增高，于7d表達(dá)最高，隨后下降；其中B組、C組和D組Nogo-A表達(dá)均低于A組，于1d、3d、7d、14d差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)；D組Nogo-A表達(dá)低于B組和C組，于1d、3d、7d、14d差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；而C組低于B組，于1d、3d、7d、14d差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。
　　結(jié)論:
　　1、大鼠急性脊髓損傷后Nogo-A和GAP-43表達(dá)均增高；其

7、中Nogo-A表達(dá)從1d開(kāi)始增高，7d達(dá)到高峰，然后下降；GAP-43表達(dá)從1d開(kāi)始增高，7d達(dá)到高峰，然后下降。
　　2、聯(lián)合組的Nogo-A的表達(dá)低于IN-1組、MP組和對(duì)照組；而聯(lián)合組的GAP-43A的表達(dá)高于IN-1組、MP組和對(duì)照組，且聯(lián)合組的BBB評(píng)分最高。
　　3、在治療急性脊髓損傷時(shí)，IN-1和MP有協(xié)同作用，其機(jī)制可能是：（1）在急性期協(xié)同抑制Nogo-A的表達(dá)；（2）在亞急性期，共同加強(qiáng)GAP-43蛋白等