產(chǎn)ESBLs大腸埃殺菌和肺炎克雷伯菌中質(zhì)粒介導的qnrA基因研究.pdf

1、一直認為喹諾酮類抗菌藥物耐藥主要由靶位改變引起，1998年Martinez-Martinez等首次報道了質(zhì)粒介導的喹諾酮類藥物耐藥基因qnr的存在，其作用機制是保護喹諾酮類藥物靶位點DNA解旋酶和拓撲異構(gòu)酶Ⅳ，使喹諾酮類藥物不易與其結(jié)合，從而導致藥物治療失敗。該基因一般位于Ⅰ類整合子，常與其他耐藥基因共存，最常見的是ESBLs基因。qnr基因在世界各地如亞洲、美洲、歐洲等地相繼被分離，越來越引起廣泛關注(因陸續(xù)出現(xiàn)新的基因型，現(xiàn)將原qn

2、r基因命名為qnrA)。 我們對實驗室保存的1998-2002年之間浙江、新疆、河南、江蘇、沈陽、澳門6個地區(qū)臨床分離的產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌263株和肺炎克雷伯菌99株進行了研究。采用瓊脂稀釋法測定抗菌藥物最低抑菌濃度(MIC)，采用脈沖腸凝膠電泳(PFGE)檢測菌株的同源性，通過聚合酶鏈反應(PCR)、接合試驗、Southern雜交、鳥槍法測序，對耐藥基因進行研究。 結(jié)果顯示263株大腸埃希菌中發(fā)現(xiàn)5株qnrA陽性株

3、(占1.9％)；99株肺炎克雷伯菌中發(fā)現(xiàn)8株qnrA陽性株(占8.1％)。13株qnrA陽性株中該基因均位于可接合性質(zhì)粒上。13株菌株同時攜帶CTX-M基因(1株CTX-M-9、5株CTX-M-14和7株CTX-M-24)。qnrA基因陽性的接合菌與受體菌J53相比，環(huán)丙沙星對前者的MIC較后者提高了4-133倍。11株環(huán)丙沙星耐藥株(MIC≥4mg/L)均存在GyrA亞基的83位氨基酸和/或87位氨基酸改變，其中8株對環(huán)丙沙星高水平耐

4、藥株(MIC≥16mg/L)同時存在ParC亞基的80位氨基酸改變。2株MIC≤4mg/L的菌株GyrA和ParC兩亞基均未發(fā)生改變。質(zhì)粒測序發(fā)現(xiàn)96號菌株中qnrA基因和CTX-M-24基因共存于一大小為50kb左右的可接合性質(zhì)粒中，qnrA基因位于Ⅰ類整合子中，CTX-M-24基因位于轉(zhuǎn)座子環(huán)境中。 以上研究表明肺炎克雷伯菌中qnrA基因的攜帶率高于大腸埃希菌。qnrA基因單獨作用僅導致低水平喹諾酮類耐藥，合并gyrA和(或