變溫?zé)崽幚斫Y(jié)合莖尖培養(yǎng)脫除沙梨離體植株潛隱病毒研究.pdf

1、蘋果褪綠葉斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus，ACLSV)、蘋果莖溝病毒(Apple stem grooving virus，ASGV)和蘋果莖痘病毒(Apple stem pitting virus，ASPV)是世界仁果類果樹上普遍發(fā)生的三種潛隱病毒，我國主栽的梨品種的平均帶病毒率為86.3％。根據(jù)果樹病毒病通過嫁接傳染等特點，目前主要通過栽培無病毒苗木減輕病毒病的危害。本研究以同時帶有這三種病毒的

2、沙梨離體植株為材料，采用變溫?zé)崽幚斫Y(jié)合莖尖培養(yǎng)方法進(jìn)行病毒脫除試驗。
　　 1．對采集的21個沙梨品種的枝條材料進(jìn)行病毒檢測，結(jié)果顯示所有材料均帶至少一種潛隱病毒，其中ACLSV的帶毒率為90.48%，ASGV85.71%，ASPV42.86%。通過莖尖培養(yǎng)（誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基為MS+0.2mg/L IBA+1.0mg/L6-BA，瓊脂5.4g/L，蔗糖30g/L，pH5.8）方法處理21個沙梨品種251個莖尖，共獲得20個沙梨品種

3、366株離體植株。結(jié)果顯示，不同沙梨品種的誘導(dǎo)分化成活率和莖尖分化系數(shù)有異，安農(nóng)一號、清香、桂冠和豐水等5個品種的成活率最高，達(dá)到100%，而金水一號未成活。中梨一號的莖尖分化系數(shù)最高，新高其次，桂冠和翠冠最低。對15個品種離體植株79個芽系進(jìn)行病毒檢測的結(jié)果顯示，ACLSV檢出率為67.09%(53/79)，ASGV86.08%(68/79),ASPV32.91%(26/79)。
　　 2．采用變溫?zé)崽幚恚?4℃/40℃，8h

4、/16 h交替）結(jié)合莖尖(大小約1mm)培養(yǎng)對8個沙梨品種的1014株帶毒離體植株進(jìn)行病毒脫除處理，共獲得8個沙梨品種的69株脫毒材料。結(jié)果顯示不同品種處理后的成活率和增殖系數(shù)有異，成活率中梨一號為14.7%，清香和金秋為9.0%，黃金為2.11%。增殖系數(shù)圓黃為2.7，新高為2，豐水、愛甘水和黃金等3個品種沒有增殖。通過RT-PCR等方法對8個沙梨品種的65株脫毒材料進(jìn)行病毒檢測的結(jié)果顯示，有5個沙梨品種的39株離體植株不帶病毒，且不