甾體化合物(4AD)羥基化菌種的篩選及產(chǎn)物鑒定.pdf

1、分類號(hào)：Q93密級(jí)：不保密學(xué)校代碼：10057研究生學(xué)號(hào)：13839504甾體化合物(4AD)羥基化菌種的篩選及產(chǎn)物鑒定ScreeningforStrainsCapableofHydroxylatingSteroids(4AD)andIdentificationofProducts專業(yè)名稱：藥物化學(xué)(理)指導(dǎo)教師：毛淑紅副教授研究生姓名：王雪榮申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：理學(xué)碩士論文提交日期：20l6年6月論文課題來(lái)源：國(guó)家863項(xiàng)目學(xué)位授予單位：天

2、津科技大學(xué)摘要雄4烯3，17雙酮(4AD)是甾體激素類藥物的重要中間體，其羥基化產(chǎn)物具有極其重要的醫(yī)藥價(jià)值。甾體藥物的生物催化羥基化反應(yīng)是工業(yè)上生產(chǎn)甾體激素類藥物的重要手段，而尋找優(yōu)良高效的新型微生物和開(kāi)發(fā)新的甾體激素藥物仍然是未來(lái)發(fā)展方向。本論文以4AD為研究對(duì)象，篩選能特異性催化4AD羥基化的菌株并對(duì)其羥基化產(chǎn)物進(jìn)行鑒定，初步考察雄烯二酮羥基化工藝。經(jīng)搖瓶培養(yǎng)和投料轉(zhuǎn)化，篩選出具有4AD羥基化能力的4株絲狀真菌：斜臥青霉(Penic

3、illiumdecumbens)、菌種TCCC41667(strainTCCC41667)、雷斯青霉(Penicilliumraistrickii)冪D赭曲霉(Aspergillusochraceus)，并對(duì)菌種TCCC41667采用形態(tài)學(xué)特征和18SrDNA基因序列系統(tǒng)發(fā)育分析進(jìn)行鑒定，發(fā)現(xiàn)菌種TCCC41667為曲霉屬。采用質(zhì)譜、核磁共振波譜及X射線晶體衍射分析等譜學(xué)方法對(duì)轉(zhuǎn)化產(chǎn)物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。4AD經(jīng)斜臥青霉轉(zhuǎn)化生成10【羥基4A

4、D和10【，6B雙羥基4AD；曲霉TCCC41667和雷斯青霉的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物均為15a羥基4AD；赭曲霉催化雄烯二酮生成11a羥基4AD。其中，10c羥基4AD和10【，6p雙羥基4AD作為甾體生物羥基化產(chǎn)物在相關(guān)文獻(xiàn)中未見(jiàn)報(bào)道，這將拓展斜臥青霉應(yīng)用范圍，為發(fā)現(xiàn)更多甾體羥基化產(chǎn)物奠定基礎(chǔ)，在甾體藥物新藥研發(fā)中具有重要意義?？疾觳煌霓D(zhuǎn)化條件對(duì)4AD轉(zhuǎn)化過(guò)程中不同產(chǎn)物積累的影響，結(jié)果表明，培養(yǎng)基中碳源蔗糖有利于斜臥青霉轉(zhuǎn)化過(guò)程中l(wèi)a，6p雙羥