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1、孔雀石綠和結(jié)晶紫是致癌、致畸、致突變的“三致”化合物。盡管大部分國(guó)家和地區(qū)包括中國(guó)已經(jīng)將其列為水產(chǎn)獸醫(yī)產(chǎn)業(yè)的禁用藥,但是在利益的驅(qū)使下,仍有不法商人在水產(chǎn)品的養(yǎng)殖、運(yùn)輸和保鮮過(guò)程中使用。我國(guó)出口的水產(chǎn)品常被檢測(cè)出孔雀石綠的殘留,使我國(guó)水產(chǎn)品出口產(chǎn)業(yè)受到不小的打擊。同時(shí)側(cè)面反映出,我國(guó)的水土環(huán)境正在或?qū)?huì)遭到孔雀石綠和結(jié)晶紫的嚴(yán)重污染。因此,加大孔雀石綠和結(jié)晶紫的檢測(cè)力度,是我國(guó)實(shí)現(xiàn)經(jīng)濟(jì)可持續(xù)發(fā)展的必然舉措之一。目前常用的孔雀石綠和結(jié)晶紫
2、殘留的有效檢測(cè)手段有高效液相色譜法、液-質(zhì)聯(lián)用法、酶聯(lián)免疫分析法等,但這些方法樣品預(yù)處理復(fù)雜,操作繁瑣,材料儀器昂貴,不利于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。因此,市場(chǎng)上亟待一種快速、靈敏的檢測(cè)手段來(lái)監(jiān)測(cè)水土環(huán)境孔雀石綠或結(jié)晶紫的污染。以luminol化學(xué)發(fā)光為基礎(chǔ)的高靈敏度分析檢測(cè)方法因具有檢測(cè)限低、分析速度快、操作簡(jiǎn)單、線性范圍長(zhǎng)等突出優(yōu)點(diǎn),近年來(lái)吸引了研究人員的廣泛關(guān)注。
本論文首先研究孔雀石綠和結(jié)晶紫對(duì)Na2CO3-luminol-H2O2三
3、元體系的化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度的影響,并設(shè)計(jì)單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)來(lái)對(duì)關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化,分別繪制孔雀石綠和結(jié)晶紫濃度對(duì)Na2CO3-luminol-H2O2三元體系相對(duì)化學(xué)發(fā)光值的標(biāo)準(zhǔn)曲線,建立基于微孔板的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)法,并對(duì)4種加標(biāo)的環(huán)境水樣進(jìn)行分析檢測(cè);制備了孔雀石綠和結(jié)晶紫的分子印跡聚合物(MG-MIPs,CV-MIPs),并用紅外光譜、掃描電鏡、平衡吸附實(shí)驗(yàn)和Scatchard分析對(duì)其進(jìn)行表征;分別用MG-MIPs和CV-MIPs灌裝成
4、固相萃取小柱,萃取加標(biāo)土壤樣品中孔雀石綠和結(jié)晶紫,使用新建立的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)法對(duì)處理后的樣品進(jìn)行檢測(cè)。
然后成功建立基于Na2CO3-luminol-H2O2三元體系的微孔板化學(xué)發(fā)光檢測(cè)孔雀石綠和結(jié)晶紫的方法??兹甘G濃度的對(duì)數(shù)值與相對(duì)化學(xué)發(fā)光值在2~800 ng·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,R2=0.9954,檢出限為0.76 ng·mL-1(3σ),4種加標(biāo)的環(huán)境水樣的回收率為90.4%~112.1%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.
5、7%~6.1%。結(jié)晶紫濃度的對(duì)數(shù)值與相對(duì)化學(xué)發(fā)光值在2~800 ng· mL-1范圍內(nèi)呈良好的現(xiàn)象關(guān)系,R2=0.9939,檢出限為0.59 ng·mL-1(3σ),4種加標(biāo)的環(huán)境水樣的回收率為88.8%~106.2%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.5%~10.9%。對(duì)于3種加標(biāo)的土壤樣品中孔雀石綠和結(jié)晶紫的回收率,與未用分子印跡固相萃取的實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)比,孔雀石綠的回收率從43.1%~57.9%提高至71.5%~83.3%,結(jié)晶紫的回收率從44.1%
6、~62.5%提高至62.1%~84.0%,經(jīng)過(guò)分子印跡固相萃取顯著提高了加標(biāo)樣品的回收率。
最后以孔雀石綠和結(jié)晶紫對(duì)Na2CO3-luminol-H2O2體系的化學(xué)發(fā)光均有顯著抑制作用為基礎(chǔ),分別建立了針對(duì)孔雀石綠和結(jié)晶紫的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)方法,配合96孔化學(xué)發(fā)光微孔板和酶標(biāo)儀輔助進(jìn)樣模塊的使用,實(shí)現(xiàn)了單個(gè)待測(cè)樣品的平行檢測(cè)、多個(gè)樣品同時(shí)檢測(cè)以及標(biāo)準(zhǔn)溶液的同步檢測(cè),提高自動(dòng)化程度,簡(jiǎn)化檢測(cè)流程,為實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)及環(huán)境預(yù)警監(jiān)測(cè)奠定基礎(chǔ)
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