超聲預(yù)處理酶膜耦合反應(yīng)制備魚鱗膠原蛋白肽的技術(shù)研究.pdf

1、本文以羅非魚魚鱗為原料，主要對(duì)魚鱗脫鈣技術(shù)、聚能式超聲波輔助熱水提取魚鱗膠原蛋白技術(shù)以及酶解膜分離反應(yīng)制備魚鱗降血壓肽技術(shù)進(jìn)行了研究，進(jìn)一步對(duì)酶膜耦合過(guò)程中的梯度稀釋補(bǔ)料技術(shù)進(jìn)行了研究。
　　本文具體的研究工作及結(jié)論如下:
　　(1)對(duì)魚鱗主要成分進(jìn)行了分析，得出魚鱗中蛋白質(zhì)和灰分分別占魚鱗重量的48.33％和34.97％，脂肪含量很少只有1.2％;魚鱗蛋白為典型動(dòng)物膠原蛋白的氨基酸組成。
　　(2)采用鹽酸對(duì)魚鱗進(jìn)行

2、了脫鈣技術(shù)研究，以脫鈣率為指標(biāo)，得出最佳的脫鈣條件為:脫鈣料液比1∶20、時(shí)間80min、酸濃度0.5mol/L，此條件下脫鈣率可達(dá)到99.42％，脫鈣后魚鱗的灰分含量為0.32％。
　　(3)以脫鈣后的魚鱗為原料，利用超聲波輔助熱水提取技術(shù)進(jìn)行膠原蛋白提取試驗(yàn)研究，得出最佳的提取膠原蛋白條件為:提取溫度80℃，液料比40mL/g、提取時(shí)間60min、pH6、脈沖超聲發(fā)聲時(shí)間8s與間歇時(shí)間5s，在此條件下提取率為81.25％。與傳

3、統(tǒng)熱水提取比較，超聲輔助提取的提取率增加了20.71％。通過(guò)多元線性回歸擬合，得到了膠原蛋白提取率與提取液溫度、液料比以及超聲提取時(shí)間之間的數(shù)學(xué)模型，得出膠原蛋白提取率的模型預(yù)測(cè)值與實(shí)測(cè)值之間無(wú)顯著性差異。對(duì)超聲處理前后的膠原蛋白進(jìn)行了傅立葉變換紅外光譜分析結(jié)果表明，超聲處理后蛋白的酰胺Ⅰ和酰胺Ⅱ最大波峰發(fā)生了改變，說(shuō)明超聲處理前后膠原蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化。
　　(4)以提取的膠原蛋白為原料，以DH、ACE抑制率為指標(biāo)，采用超

4、聲波輔助堿性蛋白酶酶解技術(shù)進(jìn)行降血壓活性肽制備技術(shù)研究，得到最佳工藝為:酶解時(shí)間25min，酶解溫度50℃、pH8.7、加酶量0.14AU/g、底物濃度2％，在此條件下得到的多肽ACE抑制率為69.37％。通過(guò)多元線性回歸擬合，得到了ACE抑制率與pH、加酶量以及底物濃度之間的數(shù)學(xué)模型，ACE抑制率的模型預(yù)測(cè)值與實(shí)測(cè)值之間無(wú)顯著性差異。
　　(5)在超聲輔助酶解魚鱗膠原蛋白最佳反應(yīng)條件下，利用稀釋梯度補(bǔ)料酶膜耦合反應(yīng)技術(shù)，進(jìn)一步改