啤酒廢酵母胞壁堿不溶性β-D-葡聚糖的制備.pdf

1、隨著我國啤酒工業(yè)的迅速發(fā)展，產(chǎn)生的啤酒廢酵母日益增多。而這些廢酵母大部分作為價(jià)格低廉的飼料使用，其價(jià)值未被充分發(fā)掘。作為酵母胞壁的主要成分，β-D-葡聚糖具有重要的生理功能。為增加廢酵母的附加值，本文建立了一種從廢酵母中提取β-D-葡聚糖的新型制備方法。研究內(nèi)容包括:β-D-葡聚糖檢測(cè)方法的比較分析，胞壁的制備，β-D-葡聚糖的提取與純化及其結(jié)構(gòu)的初步分析。主要結(jié)果及結(jié)論如下:
　　(1)對(duì)比分析了幾種β-D-葡聚糖的定量檢測(cè)方法

2、，發(fā)現(xiàn)經(jīng)酸-酶水解法處理后的測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠。水解后通過生物傳感儀法測(cè)定葡萄糖含量結(jié)果穩(wěn)定，耗時(shí)短，操作簡便。樣品中的α-葡聚糖對(duì)測(cè)定結(jié)果影響顯著，β-D-葡聚糖的含量應(yīng)為總葡聚糖含量減去α-葡聚糖含量之差。
　　(2)鑒于廣泛使用的破壁方法——自溶法破壁率低，耗時(shí)長等問題，本研究建立了一種在均質(zhì)過程中加酶破碎的新工藝（即:酶法與機(jī)械法協(xié)同破壁），分別考察了酵母濃度、復(fù)合酶比例、出口溫度、均質(zhì)壓力及次數(shù)對(duì)破壁率的影響。經(jīng)優(yōu)化得到最

3、優(yōu)條件為:酵母濃度50％(w/v)，木瓜蛋白酶添加量0.06％(v/v)，纖維素酶添加量0.04％(v/v)，出口溫度30～35℃，在1200 bar的壓力下均質(zhì)兩次，破壁率即可達(dá)到95％以上。與破壁率一般為50％左右的自溶法相比，本方法破壁率顯著升高，設(shè)備占用率低，可大幅縮短工藝耗時(shí)。
　　(3)傳統(tǒng)制備β-D-葡聚糖的方法（即:常壓堿提法），產(chǎn)品純度低，耗堿量高，堿排放量大，用時(shí)長，能耗高?；诖?，本文研究了一種制備β-D-葡

4、聚糖的新方法——高壓堿提法，通過單因素及響應(yīng)面優(yōu)化得到最優(yōu)工藝為:處理時(shí)間5 min，NaOH添加量0.85％，液料比6.5∶1，溫度108℃，制備的β-D-葡聚糖純度為78.11％，提取率為78.38％。與常壓堿提法相比，高壓堿提法獲得的β-D-葡聚糖純度高，堿使用量低，耗時(shí)短。20 L放大實(shí)驗(yàn)對(duì)該法進(jìn)行了驗(yàn)證。為了對(duì)其進(jìn)一步純化，從多種蛋白酶中篩選到中性蛋白酶Multifect Neutral，對(duì)高壓堿提后的葡聚糖進(jìn)行處理，使β-D