體外消化對(duì)紅樹(shù)莓活性成分及防護(hù)腸道細(xì)胞損傷作用的影響.pdf

1、紅樹(shù)莓富含多酚類、黃酮類、花色苷和SOD等活性物質(zhì)，這些活性成分能夠清除人體中過(guò)多的活性氧自由基(ROS)，作為天然抗氧化劑，紅樹(shù)莓具有廣闊的開(kāi)發(fā)前景。一般體外實(shí)驗(yàn)忽略了紅樹(shù)莓經(jīng)胃腸道消化吸收后的成分變化，為了科學(xué)評(píng)價(jià)紅樹(shù)莓中含有的植物化學(xué)物質(zhì)在人體內(nèi)的潛在功效，本文探究了經(jīng)體外模擬胃腸道消化前后其活性成分的變化情況。富含碳水化合物的高溫食品中含有大量丙烯酰胺(AA)，如油炸和烘焙食品，AA具有較強(qiáng)的神經(jīng)毒性、遺傳毒性、致癌性等，人類攝

2、入過(guò)量AA會(huì)導(dǎo)致腸道細(xì)胞氧化損傷，從而引起一系列腸道疾病。以天然食物作為抗氧化劑，探究其抗氧化機(jī)制，已成為一個(gè)研究熱點(diǎn)。
　　本文利用體外模擬胃腸道消化模型，分別從體外、細(xì)胞和分子水平探究了紅樹(shù)莓防護(hù)AA誘導(dǎo)的腸道細(xì)胞損傷機(jī)理。主要結(jié)果如下:
　　(1)體外模擬胃腸道消化使紅樹(shù)莓中多酚、黃酮、花色苷和原花青素等活性成分含量發(fā)生了變化，和未消化(OR)組分相比，胃消化(PG)組分中多酚、黃酮和花色苷含量有所提高，腸消化(PI)

3、組分中多酚和黃酮成分也顯著提高;紅樹(shù)莓三種組分（未消化OR、胃消化PG和腸消化PI）均表現(xiàn)出了較強(qiáng)的抗氧化活性，并呈明顯的劑量依賴關(guān)系。未消化組分(OR)、胃消化組分(PG)和腸消化組分(PI)三種樣品自由基清除率為50％時(shí)，所需紅樹(shù)莓樣品分別為3.55mg/mL、4.22 mg/mL、2.27 mg/mL，尤其是PI組分表現(xiàn)出了最高的抗氧化活性。
　　(2)通過(guò)MTT實(shí)驗(yàn)、動(dòng)態(tài)熒光可視技術(shù)和分子探針進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，AA(2.5

4、mM)可以使Caco-2細(xì)胞內(nèi)的GSH含量下降，并導(dǎo)致ROS急劇增加。大量的ROS積聚引起Caco-2細(xì)胞線粒體膜脂質(zhì)過(guò)氧化，破壞了線粒體膜的完整性，并導(dǎo)致其膜電位下降，同時(shí)AA也導(dǎo)致了細(xì)胞核損傷，最終致使Caco-2細(xì)胞損傷乃至凋亡，而紅樹(shù)莓消化樣品中和了Caco-2細(xì)胞內(nèi)的GSH消耗，抑制了線粒體膜電位下降和脂質(zhì)過(guò)氧化，并修復(fù)了細(xì)胞核損傷，大大減少了細(xì)胞內(nèi)ROS的積聚，從而防護(hù)了腸道細(xì)胞損傷。
　　(3)通過(guò)熒光定量RT-PC