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文檔簡介
1、紅樹莓富含多酚類、黃酮類、花色苷和SOD等活性物質(zhì),這些活性成分能夠清除人體中過多的活性氧自由基(ROS),作為天然抗氧化劑,紅樹莓具有廣闊的開發(fā)前景。一般體外實驗忽略了紅樹莓經(jīng)胃腸道消化吸收后的成分變化,為了科學(xué)評價紅樹莓中含有的植物化學(xué)物質(zhì)在人體內(nèi)的潛在功效,本文探究了經(jīng)體外模擬胃腸道消化前后其活性成分的變化情況。富含碳水化合物的高溫食品中含有大量丙烯酰胺(AA),如油炸和烘焙食品,AA具有較強(qiáng)的神經(jīng)毒性、遺傳毒性、致癌性等,人類攝
2、入過量AA會導(dǎo)致腸道細(xì)胞氧化損傷,從而引起一系列腸道疾病。以天然食物作為抗氧化劑,探究其抗氧化機(jī)制,已成為一個研究熱點。
本文利用體外模擬胃腸道消化模型,分別從體外、細(xì)胞和分子水平探究了紅樹莓防護(hù)AA誘導(dǎo)的腸道細(xì)胞損傷機(jī)理。主要結(jié)果如下:
(1)體外模擬胃腸道消化使紅樹莓中多酚、黃酮、花色苷和原花青素等活性成分含量發(fā)生了變化,和未消化(OR)組分相比,胃消化(PG)組分中多酚、黃酮和花色苷含量有所提高,腸消化(PI)
3、組分中多酚和黃酮成分也顯著提高;紅樹莓三種組分(未消化OR、胃消化PG和腸消化PI)均表現(xiàn)出了較強(qiáng)的抗氧化活性,并呈明顯的劑量依賴關(guān)系。未消化組分(OR)、胃消化組分(PG)和腸消化組分(PI)三種樣品自由基清除率為50%時,所需紅樹莓樣品分別為3.55mg/mL、4.22 mg/mL、2.27 mg/mL,尤其是PI組分表現(xiàn)出了最高的抗氧化活性。
(2)通過MTT實驗、動態(tài)熒光可視技術(shù)和分子探針進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),AA(2.5
4、mM)可以使Caco-2細(xì)胞內(nèi)的GSH含量下降,并導(dǎo)致ROS急劇增加。大量的ROS積聚引起Caco-2細(xì)胞線粒體膜脂質(zhì)過氧化,破壞了線粒體膜的完整性,并導(dǎo)致其膜電位下降,同時AA也導(dǎo)致了細(xì)胞核損傷,最終致使Caco-2細(xì)胞損傷乃至凋亡,而紅樹莓消化樣品中和了Caco-2細(xì)胞內(nèi)的GSH消耗,抑制了線粒體膜電位下降和脂質(zhì)過氧化,并修復(fù)了細(xì)胞核損傷,大大減少了細(xì)胞內(nèi)ROS的積聚,從而防護(hù)了腸道細(xì)胞損傷。
(3)通過熒光定量RT-PC
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