粗葉懸鉤子抗肝損傷類活性成分對CCI4損傷大鼠肝細胞的影響.pdf

1、目的：通過藥效學實驗跟蹤有效成分，篩選粗葉懸鉤子抗肝損傷類的活性成分，對有效成分進行初步鑒定，并對有效成分作用機制作初步的探討。
　　 方法：(1)中藥常規(guī)提取方法制備粗葉懸鉤子分類提取物總生物堿，并進行檢測。(2)根據(jù)總生物堿內(nèi)成分極性的不同，分別用乙酸乙酯、正丁醇、氯仿等溶劑萃取其不同極性部位。(3)制備小鼠急性肝損傷模型，并用不同極性部位進行干預，觀察效果，選取有效極性部位。(4)通過傳統(tǒng)柱層析的方法，進一步分離有效極性部

2、位，并合并極性相同或相近的餾分。(5)通過制備色譜法和高效液相色譜法，進一步分離成分。(6)培養(yǎng)大鼠肝細胞，并制備肝細胞損傷模型，通過藥物干預模型，觀察相關指標的變化，最終選取粗葉懸鉤子抗肝損傷的有效成分。
　　 結(jié)果：(1)粗葉懸鉤子抗肝損傷有效成分-129⑨的不同藥物濃度均可不同程度地降低肝細胞培養(yǎng)上清液中ALT、AST的含量；(2)129③的不同藥物濃度能不同程度地升高肝細胞培養(yǎng)上清液中SOD的活性，同時降低MDA的含量：

3、(3)129③的不同藥物濃度能不同程度地促進肝細胞的增殖；(4)129③能不同程度地調(diào)節(jié)細胞生長周期，促使細胞向S期轉(zhuǎn)化；(5)129③能顯著下調(diào)CCl4損傷的大鼠肝細胞中Caspase-3mRNA的表達，并且上調(diào)PCNAmRNA的表達。
　　 結(jié)論：(1)129③是粗葉懸鉤子中抗肝損傷的有效活性成分：(2)129⑨能保護肝細胞膜，減輕肝細胞受損的程度：(3)129③能抑制自由基的生成和脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物的生成，提高肝細胞的抗氧化能