具有平行結(jié)構(gòu)的聯(lián)鎖響應(yīng)型藥物控釋磁性納米載體的研究.pdf

1、眾所周知，腫瘤組織和正常組織之間同時存在多種差異，為此各種不同刺激響應(yīng)性的藥物載體被研究出來。然而人體內(nèi)環(huán)境復(fù)雜，單一刺激響應(yīng)性的局限性逐漸暴露了出來，為了進一步提高藥物載體對腫瘤部位的靶向性，本文根據(jù)腫瘤組織與正常組織之間的pH和 GSH濃度的差異，并引入磁性納米粒子，設(shè)計了兩種具有雙參數(shù)聯(lián)鎖響應(yīng)性的磁性載藥納米凝膠，能夠在單一的弱酸性環(huán)境或還原性環(huán)境中基本不釋放藥物，而在同時具有弱酸性和還原性的環(huán)境中快速大量釋放藥物。
　　首

2、先，我們以葡聚糖為高分子研究出一種具有聯(lián)鎖藥物釋放機制的磁性載藥納米凝膠(DOX-loaded nanogel-D)。先將葡聚糖支鏈末端同時修飾上巰基和以檸康酸酰胺鍵連接的羧基。將該葡聚糖衍生物與巰基氨基化超順磁性四氧化三鐵納米粒子，通過靜電復(fù)合和雙硫鍵連接在一起。在最優(yōu)條件下，通過平行雙交聯(lián)的方式，成功獲得92.8±4.2 nm、飽和磁強度為35.4 emu/g Fe的磁性納米凝膠。以鹽酸阿霉素(DOX)為模型藥物，研究其載藥納米凝膠

3、的體外釋藥行為，結(jié)果證實，該納米凝膠的只有在弱酸性和還原性環(huán)境同時存在的腫瘤環(huán)境中，可以大量快速地釋放藥物，而在正常的組織環(huán)境中極少的釋放。細胞毒性實驗結(jié)果表明，該納米凝膠保留了天然高分子的無毒優(yōu)勢，而其載藥凝膠可有效抑制宮頸癌細胞HeLa的生長，而對正常組織細胞 COS-7的生長抑制則遠遠弱于 DOX，顯示其對正常細胞的較低毒性。普魯士藍染色實驗和激光共聚焦實驗均證明該納米凝膠可以被細胞吞噬并且有效釋放藥物。H&E染色實驗，顯示載藥納

4、米凝膠組小鼠的腫瘤壞死部分明顯多余DOX組小鼠的腫瘤壞死部分。通過小鼠尾靜脈注射的方法，考察其體內(nèi)抗腫瘤性能，納米凝膠對腫瘤的抑制率高達67.3％，而 DOX對腫瘤的抑制率僅為38.2%，并且小鼠體重均穩(wěn)定增長表現(xiàn)出健康特征。
　　為了簡化以葡聚糖為高分子制備納米凝膠的復(fù)雜試驗步驟，縮短實驗周期。通過采用巰基化海藻酸鈉與巰基氨基化超順磁性四氧化三鐵通過靜電復(fù)合和雙硫鍵來達到平行交聯(lián)的目的。
　　實驗結(jié)果表明該載藥納米凝膠(D

5、OX-loaded nanogel-A)的粒徑為122.7±20.3 nm，表面電荷為-29.6±0.8 mV，并且具有超順磁性。體外藥物釋放實驗結(jié)果證明其具有相同的平行藥物控釋機制。體外細胞毒性實驗結(jié)果證實其本身保留了天然高分子的無毒優(yōu)勢，而其載藥納米凝膠可有效抑制宮頸癌細胞HeLa和肝癌細胞HepG2，其半數(shù)抑制率(IC50)分別為1.01μg/mL和1.57μg/mL，但是對于正常組織細胞Vero，卻表現(xiàn)出明顯較低的毒性。在體內(nèi)抗