發(fā)展蛋白質(zhì)化學(xué)合成新方法用于重要蛋白的合成與修飾.pdf

1、隨著人類基因組計(jì)劃的結(jié)束，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系已經(jīng)成為生命科學(xué)的前沿方向。蛋白質(zhì)的甲基化、磷酸化、糖基化和泛素化受到科研工作者的廣泛關(guān)注。如何獲得高純度的此類蛋白是相關(guān)研究得以進(jìn)行的關(guān)鍵。傳統(tǒng)的生物表達(dá)方法只能獲得天然氨基酸序列的蛋白質(zhì)，而翻譯后修飾蛋白往往很難獲得。最近，Schultz發(fā)展的人工編碼非天然氨基酸技術(shù)，可以將非天然氨基酸嵌入到目標(biāo)蛋白中，從而獲得某些翻譯后修飾蛋白。但是該方法蛋白表達(dá)效率較低，且可嵌入的非天然氨基酸

2、數(shù)量有限。蛋白質(zhì)化學(xué)合成技術(shù)被認(rèn)為是獲得翻譯后修飾蛋白強(qiáng)有力的手段。在蛋白質(zhì)片段連接中，Kent發(fā)展的自然化學(xué)連接反應(yīng)被成功應(yīng)用于許多重要蛋白的化學(xué)全合成中。自然化學(xué)連接反應(yīng)是通過(guò)C端硫酯肽和N端半胱氨酸肽之間化學(xué)選擇性成酰胺鍵而實(shí)現(xiàn)肽片段連接。但是，自然化學(xué)連接反應(yīng)中C端硫酯肽無(wú)法通過(guò)Fmoc固相合成方法得到。為此，Liu課題組發(fā)展了多肽酰肼法來(lái)實(shí)現(xiàn)Fmoc法中C端硫酯肽的合成。該方法具有操作簡(jiǎn)單，連接效率高的優(yōu)點(diǎn)。本文作者以多肽酰肼