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1、普魯蘭多糖是一種極具經(jīng)濟(jì)價(jià)值和開(kāi)發(fā)潛力的微生物多糖,已廣泛應(yīng)用于化工、醫(yī)藥等領(lǐng)域。本文對(duì)普魯蘭多糖發(fā)酵液的后提取工藝進(jìn)行了深入研究,主要包括發(fā)酵液中菌體的去除、吸附法同時(shí)脫除發(fā)酵液中的色素及蛋白質(zhì),主要結(jié)論有以下幾點(diǎn):
以普魯蘭多糖高產(chǎn)菌株Y68為原料制備普魯蘭多糖發(fā)酵液,研究發(fā)現(xiàn)發(fā)酵時(shí)間為70h時(shí)發(fā)酵液中多糖含量較高。同時(shí)對(duì)發(fā)酵液中菌體的去除方法進(jìn)行了探究,分別用微濾膜過(guò)濾法,三氯化鐵、氯化鋁、硫酸鐵、硫酸鋁和硫酸亞鐵等絮凝
2、劑絮凝法對(duì)發(fā)酵液中的菌體進(jìn)行去除,結(jié)果表明微濾膜過(guò)濾法較絮凝法更適合去除普魯蘭多糖發(fā)酵液中的菌體,且在0.1MPa的壓力條件下,微濾膜過(guò)濾可以完全去除發(fā)酵液中的菌體。
硅酸鎂、海泡石、凹凸棒土三種硅鎂類(lèi)吸附劑對(duì)普魯蘭多糖發(fā)酵液中色素及蛋白質(zhì)的去除效果表明,硅酸鎂在1.6%的投加量、45℃條件下,振蕩吸附發(fā)酵液(初始pH)100min,對(duì)色素、蛋白表現(xiàn)出一定的脫除效果,色素、蛋白脫除率和多糖保留率分別為51.59%、56.25%
3、、82.25%;海泡石對(duì)多糖發(fā)酵液中色素和蛋白表現(xiàn)出較好的脫除效果,在2.0%的投加量、45℃條件下,振蕩吸附發(fā)酵液80min得到色素、蛋白脫除率分別為61.64%、65.16%,多糖保留率為88.82%;凹凸棒土在三種硅鎂類(lèi)吸附劑中脫色和脫蛋白效果最好,且多糖保留率較高,在2.0%的投加量、初始pH、35℃條件下,振蕩吸附100min得到色素、蛋白脫除率分別為73.27%、70.81%,多糖保留率為92.98%。
采用活性炭
4、、硅藻土、膨潤(rùn)土三種常用吸附劑脫除普魯蘭多糖發(fā)酵液中的色素和蛋白,分別探究了時(shí)間、溫度、pH、用量等因素對(duì)吸附效果的影響,比較發(fā)現(xiàn)三種吸附劑對(duì)普魯蘭多糖發(fā)酵液色素和蛋白的脫除均有明顯效果,其中硅藻土所需時(shí)間最短、用量最少,且脫除效果最好。在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行了正交實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明硅藻土最優(yōu)吸附條件為:時(shí)間60min,溫度35℃,發(fā)酵液pH值32,吸附劑用量1.6%。在上述條件下硅藻土脫色率為80.17%,脫蛋白率為76.28%,多糖保
5、留率為89.82%。
通過(guò)比較D3520、D4020、 D4006、D101四種大孔樹(shù)臘的物理性能對(duì)樹(shù)脂進(jìn)行了篩選,并比較脫色、脫蛋白效果,結(jié)果表明D4020樹(shù)臘對(duì)普魯蘭多糖發(fā)酵液中色素和蛋白的脫除性能良好,并在吸附完成后吸附劑較容易去除,適合于普魯蘭多糖發(fā)酵液的純化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示D4020樹(shù)脂在1.6%的投加量、25℃條件下,振蕩吸附發(fā)酵液(初始pH)80min,色素、蛋白脫除率和多糖保留率分別為71.69%、59.98%、
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