普魯蘭多糖的分離純化及結構鑒定

1、普魯蘭多糖的分離純化及結構鑒定作者：曹海石添加日期：2011082023:21:02瀏覽：270次普魯蘭多糖是由茁芽短梗霉(Aureobasidiumpullulans)分泌的胞外多糖[1]它具有無毒害、粘結性強和成膜性好等優(yōu)良特性可作為食品、醫(yī)藥方面的粘合劑和包裝材料.此外也廣泛應用于水果蔬菜保鮮、種子保護、化妝品和卷煙生產(chǎn)等方面是一種新型的多功能生物產(chǎn)品有較好的應用前景[23].目前普魯蘭多糖的應用國外已申請了多項專利我們實驗室經(jīng)紫

2、外誘變篩選出一株高產(chǎn)普魯蘭多糖的菌株(AureobasidiumpullulansJB518)[4]對其產(chǎn)生的多糖進行了分離純化該純化方法簡便、回收率高.同時通過薄層層析、紅外光譜及核磁共振等方法對其結構進行了鑒定證實了它的基本結構單位為麥芽三糖每個麥芽三糖之間由A(1→6)糖苷鍵相連這為該變異菌株的應用提供了理論依據(jù).DEAE2纖維素為Whatman產(chǎn)品SephadexG2100為Pharmacia產(chǎn)品普魯蘭多糖(Pullulan)標

3、準品、麥芽三糖和普魯蘭酶(EC.3.2.1.41)為Sigma產(chǎn)品其它化學試劑均為國德國Bruker1FS66V真空型紅外光譜儀.美國Varian公司Unity400NMR儀.次溶劑DMSO2d6參考標準:DDMSO=39160樣品質量體積分數(shù)12%控溫誤差0.1℃.薄層層析(TLC)采用硅膠板法[7].在10g硅膠G260干粉中加入0102mol?L的乙酸鈉溶液25mL攪拌均勻平鋪在玻璃板上自然晾干后于120℃加熱活化30min制成硅

4、膠板.1.5剛果紅實驗Fig.1CurveelutedonDEAEcellulosecolumnbywaterFig.2CurveelutedonDEAEcellulosecolumnbyNa2B4O7solution參照文獻[8]方法.剛果紅溶液濃度為215105mol?L普魯蘭多糖溶液質量濃度為10mg?mL.將NaOH依次配成不同濃度(012～110mol?L)將普魯蘭多糖溶液和剛果紅溶液混合(體積比1∶1)然后加入與混合液等體積