極譜法在蛋白質(zhì)測(cè)定中的應(yīng)用.pdf

1、本論文利用單掃描極譜上的絡(luò)合吸附波,平行催化波測(cè)定蛋白質(zhì)，共分為五章。 第一章簡(jiǎn)述了蛋白質(zhì)和血紅素的定量分析方法及極譜絡(luò)合吸附波和平行催化波的理論知識(shí)和研究應(yīng)用。 第二章研究了血清白蛋白的絡(luò)合吸附波法測(cè)定。在pH6.3的Hac-NaAc 介質(zhì)中，血清白蛋白使鋅(Ⅱ)-2,2'-聯(lián)吡啶絡(luò)合物在-1.20V(Vs SCE)絡(luò)合吸附波還原峰電流降低，峰電流降低值與加入的牛血清白蛋白(BSA)或人血清白蛋白(HAS)的濃度在一定

2、范圍內(nèi)呈線性關(guān)系。BSA 在0.5～40mg/L范圍內(nèi)，HAS在0.5～ 50mg/L范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，檢出限均為0.2mg/L。應(yīng)用該法測(cè)定了人血清樣品中總蛋白含量，結(jié)果令人滿意。 第三章利用平行催化波測(cè)定了氯化血紅素。在pH9.5的NH3－NH4Cl 緩沖溶液中，氯化血紅素在單掃描極譜上于-0.70 V(vs.SCE)處有一不靈敏的還原波，加入過(guò)硫酸鉀可以產(chǎn)生一靈敏的動(dòng)力波，波高增大了約20 倍。利用該波檢測(cè)氯化血紅

3、素,線性范圍為7.5×10-8 mol/L～4.5×10-6 mol/L，檢出限為5.0×10-8 mol/L。 機(jī)理研究表明，該動(dòng)力波為具有吸附性的平行催化波。 第四章探討了蛋白質(zhì)三元絡(luò)合物的催化前波及蛋白質(zhì)的靈敏測(cè)定。提出了一種以鈷(Ⅱ)-2,2'-聯(lián)吡啶絡(luò)合吸附體系在滴汞電極(DME)上測(cè)定蛋白質(zhì)的新方法。 用線性掃描極譜法、循環(huán)伏安法等手段研究了該催化作用產(chǎn)生的機(jī)理。實(shí)驗(yàn)表明，蛋白質(zhì)與鈷(Ⅱ)-2,2'-

4、聯(lián)吡啶形成三元絡(luò)合物，催化了絡(luò)合物中2,2'-聯(lián)吡啶的還原。 在pH3.5 檸檬酸鈉－鹽酸緩沖溶液中，利用該三元絡(luò)合物中2,2'-聯(lián)吡啶的催化還原間接測(cè)定了蛋白質(zhì)的含量。對(duì)于BSA,HAS,溶菌酶，線性范圍為0.005～16mg/L，檢出限為0.002 mg/L。第五章研究了蛋白質(zhì)與鈷(Ⅱ)-鄰菲咯啉絡(luò)合物的相互作用及分析應(yīng)用。在pH3.5的檸檬酸鈉－鹽酸緩沖溶液中，鈷(Ⅱ)-鄰菲咯啉絡(luò)合物在單掃描極譜上于-1.10 V(vs.