雙親性殼聚糖仿生衍生物的合成、自組裝及其生物學(xué)評(píng)價(jià).pdf

1、本論文從細(xì)胞膜仿生角度出發(fā),以殼聚糖為基材,通過(guò)化學(xué)改性分別引入親水性細(xì)胞仿生性磷酸膽堿基團(tuán)和疏水性脫氧膽酸基團(tuán),制備了一種新型的雙親性殼聚糖仿生衍生物,并研究了其在水溶液的自組裝、生物安全性以及藥物包載與釋放行為。
　　我們首先對(duì)100％脫乙酰度的殼聚糖改性獲得6-O-三苯基甲醚化殼聚糖中間體,再基于Antherton-Todd反應(yīng)制備磷酸膽堿化殼聚糖(PCCs),然后與經(jīng)1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC

2、)和N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)活化的脫氧膽酸反應(yīng),最終獲得雙親性殼聚糖仿生衍生物:脫氧膽酸-磷酸膽堿-殼聚糖(DCA-PC-Cs),并采用核磁共振、紅外光譜、紫外吸收光譜對(duì)聚合物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征。
　　基于雙親性共聚物的自組裝原理,選擇所制備的雙親性殼聚糖仿生衍生物 DCA3.3-PC42-Cs(DCA取代度=3.3%,PC取代度=42%),通過(guò)超聲振蕩法,在水溶液中自組裝形成具有核/殼結(jié)構(gòu)的納米膠束。動(dòng)態(tài)光散射測(cè)定其粒徑約28

3、0nm,PDI=0.217,粒徑分布較窄,Zeta電位=5.67mV;而透射電鏡觀察表明干態(tài)的DCA3.3-PC42-Cs納米膠束呈球形,粒徑介于100-130nm之間。采用熒光探針技術(shù)測(cè)得DCA3.3-PC42-Cs具有較小的臨界膠束濃度(1.77×10-2mg/mL),且穩(wěn)定性較好,4℃下放置30天,動(dòng)態(tài)光散射測(cè)得其粒徑基本保持不變。
　　細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)表明,雙親性殼聚糖仿生衍生物DCA3.3-PC42-Cs納米膠束對(duì)小鼠胚胎成

4、纖維細(xì)胞(3T3)的半數(shù)抑制濃度IC50約為3.0mg/mL;而體外血液相容性評(píng)價(jià)(與紅細(xì)胞共孕育實(shí)驗(yàn)、溶血實(shí)驗(yàn)、C3a補(bǔ)體激活實(shí)驗(yàn))表明DCA3.3-PC42-Cs納米膠束具有良好的血液相容性,可見(jiàn)DCA3.3-PC42-Cs納米膠束具有良好的生物安全性。對(duì)小牛血清白蛋白(BSA)的吸附實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,表面磷酸膽堿基團(tuán)的引入可以有效抑制DCA3.3-PC42-Cs納米膠束的蛋白吸附作用,有利于膠束實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)循環(huán)。
　　以槲皮素為疏水性