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1、桃果實(shí)屬于呼吸躍變型果實(shí),采后成熟軟化快,易遭受病害侵染引起貯藏和物流中的大量損失。因此,需要尋求安全的手段減少桃果實(shí)采后損失。硫化氫(H2S)和亞?;撬幔℉T)兩種硫化物處理果實(shí)后無(wú)殘留毒性,本研究以蒙陰“蜜桃王”為原料,經(jīng)NaHS(硫化氫供體)和亞?;撬幔℉T)兩種含硫化合物處理,從采后病理的角度研究?jī)煞N硫化物對(duì)褐腐菌菌斑直徑、孢子萌發(fā)率和致病力的影響以及控制果實(shí)病斑擴(kuò)展和發(fā)病率的效果。從生理和分子角度探討兩種硫化物對(duì)采后蒙陰桃果實(shí)
2、苯丙氨酸解氨酶(Phenylalanine ammonialyase,PAL)、幾丁質(zhì)酶(Chitinase,CHI)和β-1,3-葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,GNS)的活性,以及對(duì)與防御酶合成相關(guān)基因表達(dá)量的影響,篩選出合適的硫化物。用其處理蒙陰桃果實(shí),通過(guò)測(cè)定與抗氧化相關(guān)酶活性和內(nèi)源硫化氫含量探討硫化物控制采后桃果實(shí)褐腐病的機(jī)理。并從生理角度探討了硫化物延緩肥城桃果實(shí)(“萊山蜜”)成熟衰老的機(jī)制,為硫化物在果實(shí)采后應(yīng)用
3、提供技術(shù)支持和理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:
?。?)用濃度為25、50、75、100 mmol L-1的NaHS以及濃度為0.1和1.0 mmol L-1的HT處理褐腐菌的菌絲和孢子,并回接到果實(shí)上,觀察病原菌的致病力。結(jié)果發(fā)現(xiàn),四個(gè)濃度的NaHS都可以抑制褐腐病的菌斑直徑、孢子萌發(fā)率和致病力,50 mmol L-1 NaHS熏蒸可以較好地抑制菌斑直徑和致病力。而0.1和1.0 mmol L-1 HT的HT對(duì)褐腐病的菌斑直徑、孢
4、子萌發(fā)率和致病力沒(méi)有抑制效果。
?。?)分別用50 mmol L-1 NaHS熏蒸以及0.1 mmol L-1的HT浸泡蒙陰桃果實(shí)2 h,接種濃度為5×105個(gè)孢子mL-1的褐腐菌孢子懸浮液,于24、48、72 h觀察桃果實(shí)的發(fā)病率和病斑直徑。結(jié)果表明,50 mmol L-1 NaHS在果實(shí)發(fā)病前期可以抑制果實(shí)病斑直徑和發(fā)病率,而HT抑制效果相對(duì)較好。50 mmol L-1 NaHS和0.1 mmol L-1的HT處理的桃果實(shí)在
5、2 h、12 h、24 h、48 h和72 h用液氮進(jìn)行取樣,測(cè)定防御酶活性,包括PAL、CHI和GNS的活性。并通過(guò)熒光定量PCR(qRT-PCT)篩選出兩種相對(duì)穩(wěn)定內(nèi)參基因,用于與防御酶合成相關(guān)基因表達(dá)量的測(cè)定。結(jié)果表明,兩種硫化物都可以提高三種防御酶活性以及防御酶相關(guān)基因的表達(dá)量,HT處理能較好提高果實(shí)防御酶活性和基因表達(dá)量。
?。?)用0.1 mmol L-1的HT處理蒙陰桃果實(shí)后接種褐腐菌,測(cè)定H2S含量和抗氧化相關(guān)酶
6、活性,包括超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、多酚氧化酶(Polyphenoloxidase,PPO)和過(guò)氧化物酶(Peroxidase,POD)。結(jié)果表明,HT處理可以提高蒙陰桃果實(shí)體內(nèi)的硫化氫含量,同時(shí)提高與抗氧化相關(guān)的酶的活性,推測(cè)HT或許可以通過(guò)提高果實(shí)內(nèi)源H2S含量和抗氧化相關(guān)酶活性而提高其抗病性。
?。?)用0.1 mmol L-1的HT處理肥城桃果實(shí)后,放入0℃冷庫(kù)貯藏,發(fā)現(xiàn)HT可以
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