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文檔簡介
1、本文以甘蔗渣、玉米秸稈等為原料,以纖維素酶和木聚糖酶為降解酶,以干酪乳桿菌NE-19為出發(fā)菌株,來進行纖維質原料的酶解以及利用酶解液發(fā)酵生產L-乳酸的研究。通過對纖維質原料進行預處理試驗,確定預處理最佳參數為:化學試劑3%NaOH,加熱時間1h,固液比1/20。通過對纖維素原料酶解進行單因素優(yōu)化試驗,得到最佳參數為:酶解時間14h,溫度50℃, pH值4.5,纖維素酶的添加量0.3g,木聚糖酶的添加量0.5g,最佳轉速100r/min,
2、兩種酶的添加方式為同時添加,不同纖維質原料之間不存在交互作用。采用優(yōu)化得到的最優(yōu)參數進行纖維質原料的酶解,還原糖產量最高達44.3 g/L,酶解率達到了88%以上。分別采用紫外線、低能離子束、硫酸二乙酯對干酪乳桿菌進行復合誘變篩選,獲得一株穩(wěn)定的L-乳酸高產菌株NE-86,其乳酸產量達到127.2g/L,比出發(fā)菌株提高15.1%。通過對發(fā)酵培養(yǎng)基進行單因素和響應面優(yōu)化,得到最佳發(fā)酵培養(yǎng)基為(g/L):葡萄糖112.5、蛋白胨16.0、牛
3、肉膏11.4、酵母膏5.6、無水乙酸鈉2.25、MgSO4·7H2O0.1、MnSO40.075、吐溫-801ml、CaCO360、pH6.8、酶解液1000ml。利用該培養(yǎng)基進行培養(yǎng),發(fā)酵96h后乳酸產量達到137.86±3.7g/L,繼續(xù)延長發(fā)酵時間到120h,乳酸產量達到141g/L,此時殘?zhí)橇績H為5.6g/L。結果說明,采用優(yōu)化得到的酶解工藝參數,纖維質原料可以很好地被降解;突變株比出發(fā)菌株具有更好的乳酸生產能力及更高的轉化率;
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