酶解纖維質原料發(fā)酵生產L-乳酸.pdf

1、本文以甘蔗渣、玉米秸稈等為原料，以纖維素酶和木聚糖酶為降解酶，以干酪乳桿菌NE-19為出發(fā)菌株，來進行纖維質原料的酶解以及利用酶解液發(fā)酵生產L-乳酸的研究。通過對纖維質原料進行預處理試驗，確定預處理最佳參數為：化學試劑3％NaOH，加熱時間1h，固液比1/20。通過對纖維素原料酶解進行單因素優(yōu)化試驗，得到最佳參數為：酶解時間14h，溫度50℃， pH值4.5，纖維素酶的添加量0.3g，木聚糖酶的添加量0.5g，最佳轉速100r/min，

2、兩種酶的添加方式為同時添加，不同纖維質原料之間不存在交互作用。采用優(yōu)化得到的最優(yōu)參數進行纖維質原料的酶解，還原糖產量最高達44.3 g/L，酶解率達到了88%以上。分別采用紫外線、低能離子束、硫酸二乙酯對干酪乳桿菌進行復合誘變篩選，獲得一株穩(wěn)定的L-乳酸高產菌株NE-86，其乳酸產量達到127.2g/L，比出發(fā)菌株提高15.1%。通過對發(fā)酵培養(yǎng)基進行單因素和響應面優(yōu)化，得到最佳發(fā)酵培養(yǎng)基為(g/L)：葡萄糖112.5、蛋白胨16.0、牛

3、肉膏11.4、酵母膏5.6、無水乙酸鈉2.25、MgSO4·7H2O0.1、MnSO40.075、吐溫-801ml、CaCO360、pH6.8、酶解液1000ml。利用該培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，發(fā)酵96h后乳酸產量達到137.86±3.7g/L，繼續(xù)延長發(fā)酵時間到120h，乳酸產量達到141g/L，此時殘?zhí)橇績H為5.6g/L。結果說明，采用優(yōu)化得到的酶解工藝參數，纖維質原料可以很好地被降解；突變株比出發(fā)菌株具有更好的乳酸生產能力及更高的轉化率；