基于植物光敏效應(yīng)的生物傳感電化學(xué)分析研究.pdf

1、藍(lán)光受體隱花色素（cryptochromes，CRY）廣泛存在于人類、動(dòng)植物以及細(xì)菌等生命體中，在調(diào)控生命正常活動(dòng)過程中有著不可替代的作用。CRY的相關(guān)研究也越來越深入，通常主要采用光譜學(xué)方法，研究光刺激后的電子傳遞過程。本論文采用電化學(xué)分析研究植物的光敏效應(yīng)，并進(jìn)行尋找構(gòu)建光敏生物傳感模型的方法研究，主要內(nèi)容分為三部分:
　　(1)選用與CRY蛋白活性中心相似，同時(shí)在電化學(xué)分析方面又已經(jīng)得到了廣泛研究的葡萄糖氧化酶，進(jìn)行葡萄糖傳

2、感器的研究，并以此驗(yàn)證傳感通路的可靠性。修飾的工作電極使用了冷場(chǎng)發(fā)射掃描電鏡(SEM)、交流阻抗譜法(EIS)、光電子能譜(XPS)、循環(huán)伏安法(CV)、開路電位-時(shí)間曲線(OCP-T)、電流-時(shí)間曲線(I-t)等多種測(cè)試手段分別進(jìn)行表征，獲得了一種簡單、新穎的葡萄糖傳感器構(gòu)建方法。
　　(2)以藍(lán)光受體隱花色素1(CRY1)作為研究對(duì)象，參考構(gòu)建葡萄糖傳感器的路徑，經(jīng)適當(dāng)調(diào)整后，分別使用三種方法將CRY1化學(xué)鍵合固定于電極表面，

3、通過電化學(xué)分析方法表征電子傳遞過程，探索光對(duì)CRY1的電荷和結(jié)構(gòu)的影響。因受到原料CRY1蛋白的表達(dá)產(chǎn)物量低等條件限制，同時(shí)該方法并沒有考慮到光調(diào)蛋白通路的整體影響，結(jié)果并未得到較為顯著的電化學(xué)分析測(cè)試結(jié)果。
　　(3)基于植物葉片全蛋白提取液中涵蓋調(diào)控通路上的絕大部分蛋白，且其蛋白在生理溶液環(huán)境中活性易維持等優(yōu)勢(shì)，直接從植物葉片中提取全蛋白。采用I-t測(cè)試方法，通過比較葉片提取液在光刺激前后的電流差異，了解其光敏效應(yīng)。結(jié)果表明，