羔羊皺胃酶的制備及應(yīng)用研究.pdf

1、近年來隨著干酪產(chǎn)量的逐漸增加，皺胃酶作為干酪制作工藝中一種重要的凝乳劑，其需求量也不斷增大，本實(shí)驗(yàn)以羔羊皺胃為原料，對(duì)皺胃酶不同的提取方法、鹽析效果、干燥制備條件以及其凝乳特性進(jìn)行了研究。
　　 羔羊皺胃酶提取條件的研究，比較了NaCl溶液和磷酸鹽緩沖液兩種提取皺胃酶的方法，系統(tǒng)研究了提取時(shí)間、提取溫度、NaCl濃度、料液比以及提取次數(shù)。NaCl溶液提取羔羊皺胃酶的最佳工藝參數(shù)為：NaCl濃度4％，羔羊皺胃與提取液的比例為1:2

2、0，提取溫度30℃，提取時(shí)間48h，提取一次，酶的最大提取活性為55000su/g，提取得率為88％;pH5.4的磷酸鹽緩沖液最佳提取工藝：NaCl濃度4％，羔羊皺胃與提取液的比例為1:20，提取溫度30℃，提取時(shí)間48h，提取一次，酶的最大提取活性為73850su/g，提取得率為92.9％。比較發(fā)現(xiàn)磷酸鹽緩沖液提取法的最大提取活性和提取得率均優(yōu)于傳統(tǒng)NaCl溶液提取法。
　　 羔羊皺胃酶粗提液的預(yù)處理，系統(tǒng)研究了絮凝劑Al2(

3、SO4)3以及HC1的添加量對(duì)去除粘蛋白雜質(zhì)凈化粗酶液的影響。結(jié)果表明向酶液中添加酶液體積4％的0.1mol/LAl2(SO4)3，離心后可獲得純化倍數(shù)為0.891，活性回收率為69％，比活為10738su/mg上清液；用1mol/LHC1將酶液pH調(diào)至2.0靜置30min，離心后可獲得純化倍數(shù)為1.6，活性回收率為84.5％，比活為15769su/mg上清液，可見后者處理效果更好。
　　 羔羊皺胃酶鹽析條件的研究，以硫酸銨和N

4、aCl為鹽析劑，系統(tǒng)研究了酶液的預(yù)處理、鹽析飽和度、鹽析時(shí)間、鹽析pH、鹽析溫度對(duì)鹽析效果的影響。結(jié)果表明硫酸銨鹽析最佳工藝條件為：鹽析前用鹽酸對(duì)酶液進(jìn)行預(yù)處理、硫酸銨飽和度90％、pH4.6、溫度4℃、鹽析14h，其鹽析沉淀活性回收率可達(dá)85％，純化倍數(shù)達(dá)2.26;NaCl鹽析最佳工藝參數(shù)為：鹽析前用Al2(SO4)3對(duì)酶液進(jìn)行預(yù)處理、NaCl飽和度75％、pH4.6、溫度4℃、鹽析20h，其鹽析沉淀活性回收率為35％，純化倍數(shù)達(dá)2.

5、13。
　　 鼓風(fēng)干燥法制備羔羊皺胃酶粉的單因素考察，結(jié)果表明干燥前調(diào)酶液(20mL)pH至4.6，鹽飽和度濃度22％至50％，在45℃的條件下干燥10h，可獲得最佳的干燥效果，其活性回收率在85％以上。
　　 羔羊皺胃酶凝乳特性的研究，以羊乳粉為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，考察凝乳條件，結(jié)果表明最適凝乳溫度為45℃、酶的最適pH為3.0-6.0、最適乳液pH為5.0-5.5、CaCl2濃度達(dá)到0.035％時(shí)凝乳活性最大、乳液中乳粉濃度大