三株海洋微生物胞外多糖的結構研究.pdf

1、海洋蘊藏著豐富的資源,海洋微生物以其獨特的生存環(huán)境能夠產(chǎn)生很多具有新穎活性的胞外多糖。本課題從三株不同來源海洋微生物發(fā)酵液中提取胞外多糖,分離純化得到純品多糖。對純品多糖的理化性質(zhì)和結構特征進行分析。研究結果如下:
　　1從遼東灣海泥放線菌 Streptomyces sp.發(fā)酵液中提取得到胞外多糖粗品LD,利用Q-Sepharose Fast Flow陰離子交換柱和Sephacryl S-100凝膠滲透柱層析分離純化得到純品多糖組

2、分LDS2。PMP柱前衍生高效液相色譜法分析表明, LDS2中僅含有Man,為甘露聚糖。高效凝膠滲透色譜法結果顯示,LDS2呈單一對稱峰,純度很高,分子量為21 kDa。紅外光譜、甲基化分析以及NMR分析表明, LDS2主要以→2)Manp(1→和→6)Manp(1→連接方式為主,也含有→2,6)Manp(1→,說明多糖糖鏈中存在分支結構。
　　2從渤海海泥放線菌Streptomyces sp.發(fā)酵液中提取得到胞外多糖粗品BB,利

3、用Q-Sepharose Fast Flow陰離子交換柱和Sephacryl S-100凝膠滲透柱層析分離純化得到兩個純品多糖組分BBW2-1和BBS2-1。PMP柱前衍生高效液相色譜法分析表明,BBW2-1中含有Man與Glu,摩爾比為1.0:15.4,BBS2-1中也僅含有Man與Glu,摩爾比為1.0:11.8,兩者都主要由葡萄糖組成。高效凝膠滲透色譜法結果顯示,兩個多糖組分均呈單一對稱峰,純度很高,分子量分別為6.2 kDa和6

4、.1 kDa,紅外光譜、甲基化分析以及NMR分析表明,BBW2-1和BBS2-1中均主要以→4)Glcp(1→和→6)Glcp(1→連接方式為主,也含有較高比例的→4,6)Glcp(1→,說明多糖有較高的分支結構。此外, BBS2-1還含有少量的→2)Glcp(1→和→4)Manp(1→。
　　3從海南紅樹林根泥真菌 Aspergillus sp.發(fā)酵液中提取得到胞外多糖粗品HB,利用Q-Sepharose Fast Flow陰離

5、子交換柱和Sephacryl S-100凝膠滲透柱層析分離純化得到四個純品多糖組分 HBW2-2、HBW2-3、HBS1和 HBS2。PMP柱前衍生高效液相色譜法分析表明,HBW2-2和HBW2-3主要由Man和Gal組成,此外還含有少量的 GalNAc,微量的 GlcN和 Glc。HBS1和 HBS2主要由Man組成,此外,HBS1含有少量GalNAc,而HBS2含有少量Gal和微量Glc。高效凝膠滲透色譜法分析發(fā)現(xiàn),HBW2-2、H

6、BW2-3、HBS1和HBS2均呈單一對稱峰,純度很高,且分子量分別為12.5,7.1,34.1和9.4 kDa。紅外光譜和甲基化分析表明,HBW2-2主要有→4)Galp(1→、→3)Manp(1→及→2)Manp(1→連接方式,含有→2,6)Manp(1→,說明有支鏈結構存在。HBW2-3主要有→4)Galp(1→、→2)Manp(1→及→6)Manp(1→連接方式,同時含有→2,6)Manp(1→,說明有支鏈結構存在。特別是,HB

7、W2-2和HBW2-3都含有Galf(1→。HBS1由相近比例的→2)Manp(1→、→4)Manp(1→及→6)Manp(1→連接成鏈,含有較高比例的→2,6)Manp(1→,說明有較高比例的分支結構。HBS2由相近比例的→4)Galp(1→、→2)Manp(1→及→6)Manp(1→連接成鏈,含有→2,6)Manp(1→和少量的→2,3)Manp(1→,支鏈程度較高。HBS2同 HBW2-2和 HBW2-3一樣,都含有Galf(1→