產(chǎn)新型胞外多糖微生物的鑒定、產(chǎn)物組分及抗氧化研究.pdf

1、近年來，隨著越來越多的新型胞外多糖的發(fā)現(xiàn)，微生物胞外多糖的研究逐漸引起人們的興趣，其主要應(yīng)用于食品、醫(yī)學(xué)、石油化工以及環(huán)境治理等方面。部分海洋微生物多糖還具有抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)活性，為臨床和醫(yī)藥護理做出了重大貢獻。
　　本文從一株實驗室保藏的能夠分泌細菌胞外多糖的菌株出發(fā)，開展了菌株的分離純化、種屬鑒定、多糖發(fā)酵條件優(yōu)化、多糖分離純化、多糖組成分析及多糖的抗氧化特性等研究工作。主要的研究結(jié)果如下：
　　(1)通過實驗室保藏菌株

2、SFEP-01菌落形態(tài)形態(tài)學(xué)觀察、生理生化試驗、16SrDNA序列分析，確定該菌株屬于假單胞菌屬，并將其命名為Pseudomonas sp.SFEP-01。
　?。?）通過單因素實驗、正交試驗和響應(yīng)面分析實驗對發(fā)酵培養(yǎng)基成分和發(fā)酵培養(yǎng)條件進行了考察，確定菌株 SFEP-01產(chǎn)多糖最優(yōu)發(fā)酵培養(yǎng)基組成為：甘油83.3g/L，酵母粉5.7g/L，氯化鈉8.2g/L；最佳發(fā)酵條件優(yōu)化結(jié)果為:發(fā)酵溫度30℃，裝液量50ml，搖床轉(zhuǎn)速180r

3、/min，接種量4％。在此優(yōu)化條件下，多糖最高產(chǎn)量達11.4g/L。
　　（3）經(jīng)乙醇沉淀法提取、三氯乙酸法除蛋白后得到粗多糖，再經(jīng)過DEAE-瓊脂糖凝膠及葡聚糖凝膠 G-100進行分離純化，得到兩個多糖組分：EPS-Ⅰ和EPS-Ⅱ，EPS-Ⅰ和EPS-Ⅱ量的比例約為3:1。收集的單一多糖組分經(jīng)透析、濃縮、冷凍干燥得到純多糖樣品。經(jīng)過水解、紙層析及高效液相色譜儀分析，確定多糖EPS-Ⅰ單糖組成為葡萄糖、甘露糖和鼠李糖，且三種組分的