布拉酵母菌高生物量及高產(chǎn)海藻糖菌株的篩選.pdf

1、布拉酵母菌(Saccharomyces boulardii)是在印尼水果荔枝中分離得到的一種益生酵母菌，它具有耐熱性，能在37℃溫度下生長(zhǎng)，屬于釀酒酵母的亞種。曾被廣泛應(yīng)用于人類抗擊腹瀉的藥物中，它對(duì)各種腸道炎癥有很好的治療作用，對(duì)小兒腹瀉及旅行者腹瀉療效尤為顯著。其生態(tài)制劑應(yīng)用于畜牧業(yè)中，有效減少病原菌的數(shù)量和降低其毒素的濃度，十分有利于動(dòng)物健康快速的生長(zhǎng)，故其在畜牧業(yè)中必將有廣闊的應(yīng)用前景。在對(duì)布拉酵母菌的研究過程中，我們發(fā)現(xiàn)其抗逆

2、性能力不強(qiáng)，在后期制備活菌制劑的過程中，死亡率較高，經(jīng)研究，海藻糖對(duì)其有神奇的保護(hù)作用。
　　 本研究通過對(duì)布拉酵母菌（本實(shí)驗(yàn)室保藏）進(jìn)行自然復(fù)壯和多次紫外誘變，獲得布拉酵母菌高生物量及高產(chǎn)海藻糖菌株。
　　 以誘變后篩選出的菌株為出發(fā)菌株，對(duì)布拉酵母菌的培養(yǎng)基成分及其培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化。優(yōu)化后得到的培養(yǎng)基成分及培養(yǎng)條件如下：最佳碳源為葡萄糖，其最適濃度10％；最佳氮源為檸檬酸三銨，其最適濃度為0.7％；玉米漿1.5％；磷

3、酸氫二鉀0.2％。最適發(fā)酵溫度為30℃；最適pH為5.5；發(fā)酵菌種培養(yǎng)16h接種，接種量為10％；采用搖瓶發(fā)酵時(shí)，搖床轉(zhuǎn)速為200r/min，三角瓶的裝液量為100mL/500mL，最適培養(yǎng)時(shí)間為18h。
　　 最后通過對(duì)比性實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證了經(jīng)誘變后的菌株在優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)基中生長(zhǎng)狀態(tài)更好，生物量可達(dá)4.2g/100ml，海藻糖含量可達(dá)56mg/100ml，與實(shí)驗(yàn)室原有菌株在普通發(fā)酵培養(yǎng)基內(nèi)相比，生物量提高35.5％，海藻糖產(chǎn)量提高了3