酵母菌的分離篩選方法

1、1酵母菌的酵母菌的分離篩選方法分離篩選方法酵母菌多數(shù)為腐生，一般生長在含糖較高，偏酸的環(huán)境中，在通氣條件下，液體培養(yǎng)比霉菌快。菌落與細(xì)菌相似，較大而厚，多數(shù)不透明，菌落光滑濕潤粘稠，乳白色，少數(shù)干皺，邊緣整齊，呈紅色或粉紅色，圓形橢圓卵形，液體培養(yǎng)基生長會生成沉淀或菌膜。含高糖濃度（45%），分離蜂蜜酵母，球擬酵母屬等嗜高滲透壓的酵母。1.1.培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：1.1葡萄糖50gL尿素1gL（NH4）2SO41gLKH2PO42.5gLN

2、a2HPO40.5gLMgSO41gLFeSO40.1gL酵母膏0.5gL孟加拉紅0.03gLPH4.55.0（富集用）★1.2乳酸馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基：馬鈴薯200gL葡萄糖（霉菌用蔗糖）20gL乳酸5ml馬鈴薯去皮切片200g，加水煮沸30min，紗布過濾，補(bǔ)足蒸餾水1L，PHPH自然。自然。（去掉乳酸可用于酵母菌和霉菌培養(yǎng)用）（富集用）★1.3麥芽汁培養(yǎng)基：1：4水6065℃水浴34小時，46層紗布過濾，可加一個蛋清加水20mL調(diào)均

3、生泡沫，倒入糖化液中，煮沸過濾，1015波林，氯霉素0.1gLPH6.06.4121℃20min（分離保存用）滅菌后加入300uml硫酸鏈霉素（集菌用）32528℃23d，培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)菌絲體跳出燒掉，集菌連續(xù)兩至三次，培養(yǎng)液變成混濁，產(chǎn)生菌膜和沉淀物。鏡檢：美蘭染液染色，活菌可還原美蘭染液，菌體無色。3.3.篩選：篩選：分離分離：取集菌液適當(dāng)稀釋，吸取0.10.2ml梯度菌液（至少兩個兩個平衡），涂布于馬鈴薯葡萄糖麥芽汁或虎紅培養(yǎng)基

4、平板，也可采用混菌法或蘸取集菌菌液直接劃線，（平放12h后倒置培養(yǎng)），25℃培養(yǎng)48h，低溫酵母菌15℃高溫酵母菌35℃40℃45℃，形成清晰菌落。在培養(yǎng)皿底劃分小方格，待菌落生長良好后，用放大鏡或低倍鏡，觀察每格內(nèi)每個菌落編號并描述，顏色表面邊緣切面等，再制片在高倍鏡下觀察各菌株的個體形態(tài)，做好記錄。選擇不同菌落分別接于麥芽汁斜面，25℃培養(yǎng)48小時備用。純化純化：培養(yǎng)基與分離培養(yǎng)基相同，否則，不同培養(yǎng)基菌落會改變形態(tài)，決不能認(rèn)為菌落

5、外觀相同菌屬于同一種。菌落外觀相近的菌落，只能挑取一至數(shù)個菌落為代表進(jìn)行純化。常用方法為平板劃線分離法：挑取單菌落于平板劃線純化菌株，2528℃23d，選擇菌生長快菌落大典型繼續(xù)純化，每個分離物至少經(jīng)兩次劃線，結(jié)合鏡檢保持菌株的純度，對于保存菌株也應(yīng)定期檢查純度。純化的菌株轉(zhuǎn)接于麥芽汁斜面2528℃2d待鑒定或用滅菌液體石蠟封面于4℃冰箱保存。篩選：性能測定：根據(jù)不同需要，選擇不同性能測定方法。篩選：性能測定：根據(jù)不同需要，選擇不同性能