產單寧酶酵母菌株的篩選.pdf

1、單寧酶全稱單寧酯酰水解酶(Tannase,EC3.11.20),可水解水解類單寧和沒食子酸酯類中的酯鍵和縮酚羧鍵,生成沒食子酸和葡萄糖。自然界中產單寧酶的微生物很多,目前研究最多的生產菌種是曲霉屬和青霉屬。與霉菌相比,酵母菌具有細胞結構簡單,易于改造,生長繁殖快等優(yōu)勢。本研究從自熱環(huán)境中篩選獲得一株產單寧酶的酵母菌株,并進行了菌種鑒定、發(fā)酵條件優(yōu)化、粗酶性質及應用于改善茶湯澄清度等方面的研究。主要研究結果如下:
　　采用富集培養(yǎng)技

2、術、平板透明圈法和搖瓶發(fā)酵篩選相結合的方法,從土壤中篩選獲得了一株產單寧酶的菌株FC6-1,初篩酶活力為2.86U/mL,通過對菌株FC6-1的形態(tài)學和26S rDNA分子生物學鑒定,確定該菌株FC6-1屬于短梗霉屬酵母菌,并采用薄層色譜法和SBA-40D生物傳感分析儀等方法對該單寧酶酶解產物進行了分析,結果表明該菌株產生的單寧酶能夠有效的水解單寧酸生成沒食子酸和葡萄糖。
　　采用單因素試驗和正交試驗對酵母菌株FC6-1的發(fā)酵培養(yǎng)

3、基組成和培養(yǎng)條件進行優(yōu)化,確定的最佳發(fā)酵培養(yǎng)基組成為(g/L):單寧酸30,玉米淀粉10,豆粕30,硫酸鎂2.0,磷酸氫二鉀1.0,氯化鈉0.5,硫酸錳0.4,氯化鈣0.2;最佳培養(yǎng)條件為:初始pH3.0,發(fā)酵溫度28℃,搖床轉速180rpm,裝液量35mL/250mL,接種量10％,發(fā)酵時間72h。優(yōu)化后酵母菌株FC6-1產單寧酶酶活力達到4.83U/mL,較優(yōu)化前提高了1.68倍。
　　對菌株FC6-1的粗酶性質進行了初步研究