二溴海因在羅非魚體內殘留及其毒理效應研究.pdf

1、二溴海因（1，3-dibromo-5，5-dimethylhydantoin，DBDMH）是一種新型殺菌消毒劑，在防治水產動物疾病中有很好的殺菌效果，目前在水產養(yǎng)殖中被廣泛應用，被認為是最有前景的消毒劑。但藥物在殺滅水體中有害病菌的同時可能在水生生物體內殘留，進而對養(yǎng)殖對象的組織器官產生不同程度的毒副作用。鑒于此，本文以吉富羅非魚為研究對象，設置不同劑量的二溴海因對其進行亞急性毒性試驗，研究二溴海因在羅非魚體內的動態(tài)消除規(guī)律，檢測亞急性

2、毒性試驗中二溴海因對肝胰臟的抗氧化酶活性的影響，并對其肝胰臟進行組織切片觀察，此外，還研究其對肝胰臟DNA的損傷情況，以此探討二溴海因對吉富羅非魚的毒理效應。研究結果如下:
　　(1)二溴海因在羅非魚體中的殘留及其消解研究
　　建立了以離子色譜法測定水產品中溴離子質量分數的方法，并用該方法檢測了二溴海因作用于吉富羅非魚后所產生的溴離子在肌肉中殘留及消解的質量分數。檢測時采用Cs12A陰離子柱分離，電導檢測，溴離子濃度為10～

3、200 mg/kg，相關系數r2=0.9963。檢測結果表明，1）不同添加水平下，該方法的回收率為82.58％～86.14％，相對標準偏差為4.61％～6.54％。因此，該方法可以應用于水產品中溴離子的定量分析;2）二溴海因濃度為0～0.3 mg/L時，肌肉中未檢出溴離子;二溴海因濃度為1.5 mg/L時，暴露前4d羅非魚肌肉中溴離子的積累在同一水平，4～16 d肌肉中溴離子質量分數呈時間-效應關系，隨時間的延長溴離子質量分數增加，第1

4、6d時溴離子在肌肉中的質量分數達最大值21.6 mg/kg，符合國際食品法典的規(guī)定。在清水中恢復10d后，肌肉中溴離子的質量分數降低?？梢?，實際生產中若二溴海因的施藥劑量為0.3～0.4 mg/L，則肌肉中溴離子質量分數對人類幾乎沒有威脅。
　　(2)二溴海因對羅非魚肝胰臟抗氧化系統(tǒng)的影響
　　采用半靜態(tài)水質接觸染毒法，研究不同濃度(0、0.06、0.3、1.5 mg/L)、不同時間(1、2、4、8、16、26d)二溴海因對

5、吉富羅非魚肝胰臟總還原性谷胱甘肽(T-GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)、谷胱甘肽-S-轉移酶(GST)、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽還原酶(GR)及谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)的影響。結果表明:肝胰臟SOD、CAT、GPx和GSH/GSSG在0.06 mg/L、0.3 mg/L、1.5 mg/L三個二溴海因暴露濃度下，隨著暴露時間的延長表現為先被誘導后被抑制的變化趨勢;肝胰臟GR、GST和T-GSH在0.

6、06 mg/L、0.3 mg/L、1.5 mg/L三個二溴海因暴露濃度下均被抑制。恢復試驗結果表明持續(xù)給藥0.06～1.5 mg/L二溴海因會對吉富羅非魚造成不可逆損傷，且隨二溴海因濃度增加，不可逆損傷加重。但實際生產中使用的二溴海因短時間內基本降解，所以損傷不大。
　　(3)二溴海因對羅非魚肝胰臟組織結構變化的影響
　　采用H-E染色法對亞急性毒性試驗的肝胰臟樣本進行石蠟切片觀察。結果發(fā)現:三個濃度暴露下羅非魚肝胰臟組織損

7、傷隨暴露時間的延長而加重，并且肝胰臟組織損傷隨二溴海因濃度的升高而增強，高濃度組對肝胰臟組織的損傷毒性作用明顯高于低濃度組。損傷后主要表現為肝細胞腫脹、肝細胞水樣變、肝細胞脂肪變、肝血竇淤血、肝中央靜脈淤血等病狀。恢復試驗中各濃度組羅非魚肝胰臟組織結構損傷都有所恢復，表明0.06 mg/L～1.5 mg/L二溴海因在短時間內(16d)對羅非魚肝胰臟組織結構造成可逆性損傷。實際生產中使用的二溴海因短時間內基本降解，所以損傷不大。
　

8、　(4)二溴海因對羅非魚肝胰臟DNA損傷的影響
　　二溴海因暴露第4天、8天、16天，采取羅非魚肝胰臟組織，利用單細胞凝膠電泳技術立即測定二溴海因對肝胰臟的DNA損傷指標-尾部DNA量(TDNA％)、尾長(TL)、尾矩(TM)、Olive尾矩(OTM)。結果顯示，肝胰臟DNA損傷程度隨著暴露時間的增加逐漸加劇，在暴露第16天，DNA損傷最為嚴重。暴露短期內，與對照組相比，各劑量組DNA損傷差異不顯著(P＞0.05)，暴露中期，低劑