水牛精子經(jīng)流式細胞儀分離后對其質(zhì)量的影響.pdf

1、本研究主要探討流式細胞儀分離三頭水牛精子過程中,精子的活力、運動參數(shù)、質(zhì)膜完整率、線粒體膜電位、項體損傷、DNA損傷和凋亡的變化情況以及分離冷凍解凍后精子ICSI效率。在水牛精子分離、冷凍過程(新鮮、染色后、分離后和冷凍解凍后)中,分別采用熒光顯微鏡和流式細胞儀檢測分析精子品質(zhì)。結(jié)果發(fā)現(xiàn),染色組精子活力與鮮精組相比差異不顯著,分離組和冷凍解凍組的精子活力急劇下降,且與前面兩組相比差異顯著(p＜0.05)。染色組和分離組精子的運動參數(shù)(V

2、AP、VSL、VCL、BCF和LIN)與鮮精組相比差異不顯著(p＞0.05),而冷凍解凍后除LIN外,其他運動參數(shù)值都顯著降低,與鮮精組相比差異顯著(p＜0.05)。染色和分離過程對精子質(zhì)膜和線粒體膜電位無明顯影響;但冷凍解凍會導(dǎo)致精子質(zhì)膜完整率和線粒體膜電位均顯著下降(p＜0.05)。在頂體損傷方面,冷凍解凍后精子頂體損傷程度顯著增加,與前面新鮮、染色后和分離后精子相比,均差異顯著(p＜0.05)。水牛精子分離后,其DNA損傷率顯著減

3、少(p＜0.05),但冷凍解凍后,精子DNA損傷急劇增加。隨著分離過程的進行精子凋亡率逐漸增加,冷凍解凍后精子凋亡率顯著高于其它各組(新鮮、染色后和分離后)(p＜0.05)。另外,本研究還利用兩頭公牛(B和C)的X精子進行單精子顯微注射實驗,結(jié)果發(fā)現(xiàn)水牛B和C冷凍解凍分離精子ICSI后囊胚率分別為12.94％和12.12％;在水牛卵母細胞成熟液中添加胱氨酸(cys),再用B和C公牛的X精子ICSI后囊胚率無明顯變化。
　　 結(jié)論