茶黃素酶促氧化制備技術(shù)的研究.pdf

1、茶黃素(Theaflavins,TFs)是目前茶葉深度開發(fā)領(lǐng)域中研究的熱點(diǎn)成分,在天然藥物、功能食品、日用化工、功能飲料等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用前景.但是,紅茶中茶黃素的含量非常低,從紅茶中提取制備茶黃素,分離純化難度大且得率低,工業(yè)化生產(chǎn)成本高,這嚴(yán)重影響著茶黃素產(chǎn)業(yè)化開發(fā)的進(jìn)程及茶黃素的廣泛應(yīng)用.該文在前人研究的基礎(chǔ)上,通過摸索最佳反應(yīng)條件,選用不同的酶源和底物,采用生物酶促氧化的方法制取含量較高的茶黃素粗品,旨在為茶黃素的提取分離與純

2、化提供高含量的基料.該研究首次使用的蘋果和梨子作為多酚氧化酶(PPO)的酶源來制取茶黃素,取得了很好的效果,為茶黃素的酶促氧化制備提供了一條新的高效途徑.反應(yīng)條件的優(yōu)化研究表明,在該試驗(yàn)的反應(yīng)體積下,茶黃素酶促合成的最佳條件為:溫度為30℃,反應(yīng)體系的最佳pH值為4.8,底物濃度為0.9g/100ml,酶濃度為28g/100ml(以鮮葉重量計(jì)),通氧量為0.4 1/min.溫度和pH值是反應(yīng)體系中兩個(gè)重要的影響因素(P<0.05).PP

3、O酶源篩選研究表明,在供試的酶源中,對茶黃素的形成與積累的效果依次為:梨子>茶葉>蘋果>微生物(1號,多孔菌,Polyporus;2號,毛栓菌,Trametes trigii;3號和4號是作者分離純化得到,屬于尚未鑒定的霉菌類).利用梨子PPO制取茶黃素,其含量高達(dá)45.727％,制率也高達(dá)41.11％.而在供試的茶鮮葉中,蘋云較好,櫧葉齊次之,在以蘋云冷凍葉為酶源制取的茶黃素含量達(dá)33.737％,制率達(dá)42.22％,非冷凍葉的茶黃素達(dá)

4、14.5％,制率為72.22％.在自選微生物菌種中,自選4號>3號>2號和1號.不同底物的篩選試驗(yàn)研究表明,在本試驗(yàn)條件下,高EGC的兒茶素氧化效果最好.小葉種兒茶素比大葉種兒茶素的效果要好.雙液相試驗(yàn)研究表明,不同的酶源對雙液相體系的試驗(yàn)效果不同,就茶鮮葉而言,采用雙液相效果明顯比單液相顯著.在雙液相系統(tǒng)中,非冷凍葉制取茶黃素其總含量達(dá)49.308％,制率為59.44％.而對蘋果和梨子而言,單液相比雙液相要效果好些.不同緩沖液試驗(yàn)研究