固定化酶法生產(chǎn)葡萄糖酸鈉研究.pdf

1、分類號(hào)：TQ920密級(jí)：不保密學(xué)校代碼：10057研究生學(xué)號(hào)：12812517固定化酶法生產(chǎn)葡萄糖酸鈉研究ResearchingonTheProductionofSodiumGluconatebyImmobn娩edEnzyme專業(yè)名稱：微生物與生化藥學(xué)(理)指導(dǎo)教師姓名：路福平教授研究生姓名：賀玉蘭申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：理學(xué)碩士論文提交日期：2015年6月論文課題來(lái)源：企業(yè)委托學(xué)位授予單位：天津科技大摘要葡萄糖酸鈉在食品、建筑、紡織染料等領(lǐng)域有

2、著廣泛的應(yīng)用，國(guó)內(nèi)外對(duì)其需求量逐年增加。酶法生產(chǎn)葡萄糖酸鈉因其環(huán)境友好、經(jīng)濟(jì)節(jié)約，而越來(lái)越受到人們的青睞。但酶在實(shí)際應(yīng)用中也存在諸多缺陷，難以從反應(yīng)體系中回收，最終導(dǎo)致生產(chǎn)成本的提高。本文采用固定化酶法生產(chǎn)葡萄糖酸鈉，通過(guò)研究不同固定化方法對(duì)酶固定化效果影響以及固定化酶法生產(chǎn)葡萄糖酸鈉的工藝優(yōu)化，達(dá)到了葡萄糖酸鈉的經(jīng)濟(jì)高效生產(chǎn)。本文首先對(duì)戊二醛交聯(lián)法、海藻酸鈉包埋法、環(huán)氧樹脂共價(jià)法固定化效果進(jìn)行研究，通過(guò)比較固定化酶的單位酶活、酶活回收

3、率，最終選擇環(huán)氧樹脂共價(jià)法作為酶固定化的方法。確定了固定化葡萄糖氧化酶(GOD)和固定化過(guò)氧化氫酶(CAT)的最佳固定化條件分別為：E洲19，加酶量10mL和O8mL；pH為65和60；磷酸鈉濃度均為10M；溫度為20℃和30℃；固定時(shí)間24h和32h。將GOD和CAT分別固定在環(huán)氧樹脂E叫上，并對(duì)其酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行研究。研究了溫度、pH、金屬離子、儲(chǔ)存時(shí)間對(duì)酶和固定化酶活力的影響。固定化GOD的最適反應(yīng)溫度38℃，較游離酶分別提高6℃，最

4、適反應(yīng)pH為65比游離酶高05。60℃保溫1h，固定化GOD殘留酶活在80％以上，游離酶殘留酶活急劇下降至12％。Zn升對(duì)固定化GoD酶活性具有顯著的激活作用，cu2、A礦、Hg抑制酶活性。經(jīng)過(guò)7周的儲(chǔ)存之后，固定化GOD的殘留酶活保留了904％。固定化CAT和游離CAT的最適反應(yīng)溫度均為30℃，最適pH70，比游離酶高02。Zn2、Ca2、Cu2、Cr3對(duì)固定化CAT酶活性有抑制作用；Cu2對(duì)酶的抑制作用最強(qiáng)。固定化CAT儲(chǔ)存7周后剩