還原型谷胱甘肽抗單側(cè)輸尿管結(jié)扎大鼠腎間質(zhì)纖維化作用機(jī)制研究.pdf

1、目的:腎間質(zhì)纖維化(renal interstitial fibrosis,RIF)是各種腎臟疾病進(jìn)展至終末期腎功能衰竭所共有的病變過程。病變腎組織中腎間質(zhì)纖維化程度比腎小球硬化程度更加影響患者腎功能的水平[1]。腎間質(zhì)纖維的程度是影響腎臟10年存活率的最重要的影響因素。也就是說如果能夠有效的防治腎間質(zhì)纖維化,就能夠有效的保護(hù)腎臟功能。因此,對于腎間質(zhì)纖維化的發(fā)生、發(fā)展的防治已成為腎臟病學(xué)者熱切關(guān)注的課題。還原型谷胱甘肽(glutath

2、ione,GSH)具有重要的抗氧化作用和解毒作用[2]。在臨床工作中我們發(fā)現(xiàn)還原型谷胱甘肽對腎臟功能具有保護(hù)作用[3-4],但其確切機(jī)制尚末明了,對于這種機(jī)制的研究有助于評價(jià)還原型谷胱甘肽在治療腎臟病中的意義。單側(cè)輸尿管接扎(UUO)是一個成熟的腎間質(zhì)纖維化模型,腎小球病變不明顯,本試驗(yàn)以此動物模型為平臺,選用還原型谷胱甘肽干預(yù),通過觀察腎臟病理改變、免疫組織化學(xué)方法檢測核因子-κB(NF-κB),轉(zhuǎn)化生長因子(transforming

3、 growth facter-β,TGF-β1)的表達(dá)變化,從細(xì)胞水平探討還原型谷胱甘肽抗腎間質(zhì)纖維化,保護(hù)腎功能的機(jī)制
　　 方法:將健康雄性SD大鼠54只隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham-operatedrats,Sham組)和手術(shù)組(UUO組)、GSH治療組(GSH組)。GSH組術(shù)后即給予還原型谷胱苷肽注射液400mg/kg/d腹腔注射,Sham組及UUO組腹腔注射等體積的生理鹽水。實(shí)驗(yàn)期間大鼠給與自由進(jìn)食水,動物飼養(yǎng)環(huán)境溫度1

4、8～28℃,相對濕度40～60％,定時(shí)日光照射12h/d。術(shù)后3天、7天、14天分批處死,每次隨機(jī)處死6只。檢測血尿素氮、血肌酐、腎組織中超氧化物歧化酶(T-SOD)、還原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量。腎組織HE、Masson染色,免疫組織化學(xué)ABC法檢測核因子-κ(B(NF-κB),轉(zhuǎn)化生長因子(ttansforming growth fatter-β1,TGF-β1)在腎組織中的表達(dá)。
　　 結(jié)果:①術(shù)后第3天

5、、7天、14天Sham大鼠血尿素氮、肌酐、T-SOD、MDA及GSH均無明顯變化(P＞0.05);術(shù)后第3天、7天、14天UUO組大鼠血尿素氮、肌酐及MDA進(jìn)行性升高,T-SOD進(jìn)行性下降,與Sham組相比有顯著差異(P＜0.05);GSH組術(shù)后第3天、7天、14天與Sham組相比大鼠血尿素氮、肌酐及MDA也有顯著升高,T-SOD、GSH下降,也有顯著差異(P＜0.05),但與UUO組在術(shù)后對應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)相比,血尿素氮、肌酐及MDA升高幅

6、度均顯著降低,T-SOD、GSH下降幅度顯著減少(P＜0.05);②Sham組術(shù)后腎臟病理無明顯變化,UUO組各時(shí)間點(diǎn)腎間質(zhì)損傷程度比Sham組和治療組嚴(yán)重;③免疫組化結(jié)果表明Sham組NF-κB,TGF-β1均有少量表達(dá),UUO組上述指標(biāo)表達(dá)在第3天、7天、第14天組均明顯表達(dá),GSH組在各時(shí)間點(diǎn)NF-κB,TGF-β1的表達(dá)均低于UUO組(P＜0.05),但高于Sham組(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:單側(cè)輸尿管結(jié)扎可造成大