NF-κB在單側(cè)輸尿管梗阻大鼠腎間質(zhì)纖維化模型中的作用.pdf

1、腎小管間質(zhì)纖維化(RIF)是導(dǎo)致各種腎臟疾病進(jìn)展到終末期腎衰竭的共同通路。大量的研究均證實(shí)小管間質(zhì)的損害程度與慢性腎臟疾病(CKD)患者的腎功能損害程度呈正相關(guān)關(guān)系，阻止或延緩其進(jìn)程已成為當(dāng)前腎臟疾病防治戰(zhàn)略的關(guān)鍵問(wèn)題之一。NF-κB參與了許多腎臟疾病發(fā)生發(fā)展過(guò)程，目前國(guó)內(nèi)外對(duì)NF-κB在腎小球腎炎中的作用研究相對(duì)較多，但在RIF中的研究尚少。此研究中，通過(guò)建立單側(cè)輸尿管梗阻(UUO)大鼠腎問(wèn)質(zhì)纖維化模型，并用NF-κB特異性抑制劑吡咯

2、二硫氨基甲醋酯(PDTC)治療，觀察模型組和不同劑量治療組腎組織NF-κB活性變化，小管間質(zhì)損傷程度及TGF-β1、MCP-1表達(dá)的變化，以了解NF-κB在腎間質(zhì)纖維化中的作用，以及抑制NF-κB對(duì)腎間質(zhì)纖維化的治療效應(yīng)，為探討腎間質(zhì)纖維化機(jī)制奠定理論基礎(chǔ)，同時(shí)也為NF-κB相關(guān)藥物在腎間質(zhì)纖維化防治的臨床應(yīng)用上提供理論依據(jù)。 [方法]SD大鼠行單側(cè)輸尿管梗阻術(shù)，術(shù)后隨機(jī)分為觀察組(5只，術(shù)后每周處死1只，觀察梗阻側(cè)腎臟病理變化

3、)和實(shí)驗(yàn)組(40只)。實(shí)驗(yàn)組又隨機(jī)分為模型組(即安慰劑組，10只，生理鹽水腹腔注射，2次/d)、低劑量治療組(10只，50mg/kg/dPDTC腹腔注射，2次/d)、中劑量治療組(10只，100mg/kg/dPDTC腹腔注射，2次/d)、高劑量治療組(10只，200mg/kg/dPDTC腹腔注射，2次/d)。各治療組術(shù)后第3周開始給藥，術(shù)后第4周末處死大鼠取雙腎，常規(guī)HE、PASM染色法觀察其病理變化并計(jì)算各組腎小管間質(zhì)損傷指數(shù)，電泳遷

4、移率變動(dòng)分析法(EMSA)檢測(cè)腎組織中NF-κB的活性，SABC免疫組化法檢測(cè)TGF-β1、MCP-1在腎臟中的表達(dá)。所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理。 [結(jié)果]觀察組：術(shù)后前3周，腎小球大致正常，術(shù)后第4周腎小球出現(xiàn)輕度系膜增生；術(shù)后第1周即出現(xiàn)小管擴(kuò)張，進(jìn)而出現(xiàn)間質(zhì)大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，術(shù)后第3周開始出現(xiàn)小管萎縮，小管上皮細(xì)胞壞死、脫落，直至第5周出現(xiàn)明顯腎間質(zhì)的纖維化。 實(shí)驗(yàn)組：所有對(duì)側(cè)腎組織形態(tài)學(xué)表現(xiàn)無(wú)明

5、顯異常，NF-κB無(wú)活性，小管間質(zhì)內(nèi)偶有TGF-β1、MCP-1表達(dá)；模型組術(shù)側(cè)腎臟出現(xiàn)明顯小管萎縮、間質(zhì)纖維化表現(xiàn)，小管間質(zhì)損傷指數(shù)與對(duì)側(cè)比較差異有顯著性(p＜0.01)，腎組織中NF-κB的活性明顯增高，與對(duì)側(cè)比較差異有顯著性(p＜0.01)，小管間質(zhì)TGF-β1、MCP-1表達(dá)明顯升高，與對(duì)側(cè)比較差異有顯著性(p＜0.01)；PDTC治療組腎臟病理?yè)p害明顯減輕，腎組織NF-κB活性明顯降低，小管間質(zhì)TGF-β1、MCP-1表達(dá)明顯

6、減弱，各治療劑量組與對(duì)側(cè)、模型組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)，各治療劑量組之間比較差異有顯著性(p＜0.01)。腎組織NF-κB活性與TGF-β1、MCP-1表達(dá)呈正相關(guān)，腎小管間質(zhì)損傷指數(shù)與NF-κB活性、TGF-β1、MCP-1表達(dá)呈正相關(guān)。 [結(jié)論]NF-κB在RIF的發(fā)生進(jìn)展中起著重要作用，在纖維化過(guò)程中其活性顯著增強(qiáng)，介導(dǎo)下游炎癥和致纖維化細(xì)胞因子的表達(dá)上調(diào)，最終導(dǎo)致腎間質(zhì)纖維化；使用NF-κB特異性抑制劑可抑制