貽貝抗菌肽的分子設計、結構與功能研究.pdf

1、抗菌肽是生物體在抵抗病原微生物的過程中自身產生的一類的肽類小分子，具有高效殺菌和不容易產生耐受性等優(yōu)勢，在新型生物抗生素的開發(fā)中具有廣闊前景，海洋抗菌肽研究是當前熱點之一。
　　 為研究貽貝抗菌肽結構與功能的關系，同時對貽貝抗菌肽的人工設計與改造提供新的思路，本文以抗菌肽Mytilin-1（從厚殼貽貝血清中提取到）為研究對象，對其進行了空間結構模擬。為驗證Mytilin-1的活性位點，我們對形成連接兩段α-折疊的β-發(fā)夾結構所包

2、含的肽段進行了截取和重新設計，并采用固相化學合成法，合成了兩條新的序列相反的十肽：MDP-1和MDP-2。
　　 實驗表明，MDP-1和MDP-2均具有廣譜抗菌活性，對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌以及真菌均具有殺滅活性，MDP-2對于部分海洋弧菌類以及人類常見致病菌也有明顯的的抑制作用。MDP-1和MDP-2均表現(xiàn)出很強的熱穩(wěn)定性，而且MDP-2在人血漿中經(jīng)37℃孵育24hr后其抗菌活性未見明顯下降。特殊的是，MDP-2的抗菌活性

3、要比MDP-1高4到20倍。
　　 為進一步了解MDP-1和MDP-2的空間結構和功能的關系，我們利用核磁共振技術NMR對其空間結構進行了解析，結果表明，MDP-1和MDP-2的空間結構與Mytilin-1的結構相比，其loop區(qū)域并未采取規(guī)則的β-發(fā)夾結構，而是采取了一種不規(guī)則的環(huán)結構（Loop）。MDP-1和MDP-2的氨基酸序列相反，其主鏈走向也有所差別，主要表現(xiàn)在loop的走向以及兩條臂的走向有所不同；而氨基酸側鏈，特別

4、是MDP-1和MDP-2在兩個Arg側鏈的分布上存在明顯不同，MDP-1的兩個Arg側鏈分布于loop的兩側，而MDP-2的兩個Arg側鏈位于loop的同一側。這種分布特征有助于MDP-2正電荷的集中分布。鑒于此前的研究中，位于該loop上的兩個Arg被認為是與其抗菌活性有直接聯(lián)系，因此，在MDP-1和MDP-2中這兩個Arg的分布的差異有可能是造成MDP-1和MDP-2的抗菌活性差異的原因。
　　 研究結果為深入了解Mytil