南極磷蝦蛋白提取技術(shù)研究.pdf

1、南極磷蝦生物資源量巨大,富含高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值蛋白質(zhì)成分。但由于技術(shù)上的瓶頸,目前為止該蛋白資源尚未得到充分利用。本論文從磷蝦蛋白換算系數(shù)的確定、磷蝦蛋白提取、脫氟和多級(jí)逆流技術(shù)的應(yīng)用等方面展開,主要研究結(jié)果如下:
　　1.提出一種蛋白換算系數(shù)(nitrogen-to-protein conversion factor,NPCF)的理論計(jì)算模型,以大豆、乳等多種蛋白質(zhì)的氨基酸分析結(jié)果進(jìn)行了模擬計(jì)算,并對(duì)比國(guó)標(biāo)(GB50095-2010)中

2、的蛋白換算系數(shù)推薦值得到蛋白中谷氨酸+天冬氨酸與谷氨酰胺+谷氨酰胺的比值(AO/AE)范圍為1.37±0.85。通過上述模型對(duì)南極磷蝦等的換算系數(shù)進(jìn)行測(cè)算,發(fā)現(xiàn)它們的變化區(qū)間為5.68±0.10。
　　2.采用 ISP技術(shù)提取南極磷蝦蛋白。在 pH值1.00-13.75范圍考察了南極磷蝦蛋白和氟離子溶解規(guī)律。結(jié)果表明,南極磷蝦蛋白在 pH4.50溶出量最小,而在 pH13.50溶出量達(dá)到最大值。據(jù)此改進(jìn)磷蝦蛋白提取條件,使蛋白回收

3、率提高至63.50％。氟離子溶出基本不隨 pH值變化(16.78-20.50 mg/L之間波動(dòng)),據(jù)此確定等電點(diǎn)水洗脫氟。經(jīng)四次水洗后,氟離子去除率達(dá)98.14±0.01%(蛋白損失僅5.14±0.21%)。等電聚焦(IEF)分析南極磷蝦蛋白在不同 pH值下的溶出分布顯示,pH13.5的極端條件對(duì)磷蝦蛋白的等電點(diǎn)影響不大。常溫下,南極磷蝦蛋白6 h的自溶率不足1.00%。
　　3.采用多級(jí)逆流技術(shù)進(jìn)行上述提取和脫氟技術(shù)的改進(jìn)。首先

4、考察了 pH13.50溶液體系對(duì)磷蝦蛋白的極限溶解力,并用 SDS-PAGE半定量分析了磷蝦蛋白溶解過程的蛋白種類分布。在考察了多次提取過程后,將多級(jí)逆流技術(shù)分別用于蛋白提取和氟脫除,并對(duì)蛋白提取條件作了單因素實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明,在 pH13.50時(shí),南極磷蝦蛋白極限溶解力可達(dá)36.96±0.82 mg/mL。磷蝦蛋白組分分子量主要集中在18.4,35.0-45.0和116.0 kDa三個(gè)區(qū)域,且不同區(qū)域的蛋白顯示不同的溶解特性。采用多級(jí)逆